149 школа калининского: Школа №149 Санкт-Петербург – 39 отзывов

ГБОУ СОШ № 149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА

Обновить браузер

Обновить браузер

Возможности

Интеграция

О системе

Статистика

Контакты

CfDJ8HJyMSOWarhLkJBDZs2NT-Eq0ZkjjGSpBaGrbd-fl4h5O2yfwgkdw2J0dpkWIoCUQPNRDQZZ6JRcZ1WVlyFxvzUYyxvau8sDP9q81zV75_cA6l_6oYWfTPKWKg64cZur849tgOkw8zWGyjWLNGs5zKA

Описание поисковой системы

энциклопедия поиска

ИНН

ОГРН

Санкционные списки

Поиск компаний

Руководитель организации

Судебные дела

Проверка аффилированности

Исполнительные производства

Реквизиты организации

Сведения о бенефициарах

Расчетный счет организации

Оценка кредитных рисков

Проверка блокировки расчетного счета

Численность сотрудников

Уставной капитал организации

Проверка на банкротство

Дата регистрации

Проверка контрагента по ИНН

КПП

ОКПО

Тендеры и госзакупки

Поиск клиентов (B2B)

Юридический адрес

Анализ финансового состояния

Учредители организации

Бухгалтерская отчетность

ОКТМО

ОКВЭД

Сравнение компаний

Проверка товарных знаков

Проверка лицензии

Выписка из ЕГРЮЛ

Анализ конкурентов

Сайт организации

ОКОПФ

Сведения о регистрации

ОКФС

Филиалы и представительства

ОКОГУ

ОКАТО

Реестр недобросовестных поставщиков

Рейтинг компании

Проверь себя и контрагента

Должная осмотрительность

Банковские лицензии

Скоринг контрагентов

Лицензии на алкоголь

Мониторинг СМИ

Признаки хозяйственной деятельности

Репутационные риски

Комплаенс

Реквизиты

Полное название организации

ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ СРЕДНЯЯ ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНАЯ ШКОЛА № 149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА

Английское название

GBOU SOSH N 149 KALININSKOGO RAIONA SANKT-PETERBURGA

Адрес

г. Санкт-Петербург, ул. Черкасова, д. 4 к. 2 литера А

ОКФС

Собственность субъектов Российской Федерации

ОКОПФ

Государственные бюджетные учреждения субъектов Российской Федерации

ОКОГУ

– образования и науки

ИНН

7804087205

ОГРН

1027802499152

КПП

780401001

ОКАТО

Город Санкт-Петербург город федерального значения, Калининский

ОКПО

50870114

ОКТМО

Санкт-Петербург, Внутригородские муниципальные образования города федерального значения Санкт-Петербурга (см. также 40 900 000), муниципальный округ № 21

Телефон

Электронная
почта

Сайт

Сведения отсутствуют

Информация о компании

Руководитель

Степанова Елена Вадимовна, директор *

Размер предприятия

Численность персонала

Филиалы

Данные без учета обновлений, доступных в системе СПАРК.
Для получения актуальных данных – .

Сведения о государственной регистрации

Дата регистрации

18.11.2002

Регистрирующий орган

Межрайонная ИФНС России №15 по Санкт-Петербургу

Адрес регистрирующего органа

191124,Санкт-Петербург г,Красного Текстильщика ул,10-12 лит.О

Регистрирующий орган, в котором находится регистрационное дело

Межрайонная инспекция Федеральной налоговой службы №15 по Санкт-Петербургу

Виды деятельности

Основной вид деятельности по ОКВЭД

Образование основное общее

Дополнительные виды деятельности

Образование начальное общее

Образование среднее общее

Образование дополнительное детей и взрослых

Описание

Компания ГБОУ СОШ № 149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА, адрес: г. Санкт-Петербург, ул. Черкасова, д. 4 к. 2 литера А зарегистрирована 18.11.2002. Организации присвоены ИНН 7804087205, ОГРН 1027802499152, КПП 780401001. Основным видом деятельности является образование основное общее, всего зарегистрировано 4 вида деятельности по ОКВЭД. Связи с другими компаниями отсутствуют.
Количество совладельцев (по данным ЕГРЮЛ): 1, директор – Степанова Елена Вадимовна.
Компания ГБОУ СОШ № 149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА не принимала участие в тендерах. В отношении компании было возбуждено 1 исполнительное производство. ГБОУ СОШ № 149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА участвовало в 2 арбитражных делах: в 2 в качестве ответчика.

Реквизиты ГБОУ СОШ № 149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА, юридический адрес, официальный сайт и выписка ЕГРЮЛ доступны в системе СПАРК (демо-доступ бесплатно).

Статус компании

Полная информация о компании ГБОУ СОШ № 149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА

СПАРК-Риски

Одностраничный отчет с самой важной информацией из СПАРК

299₽

• Регистрационные данные компании
• Руководитель и основные владельцы
• Контактная информация
• Факторы риска
• Признаки хозяйственной деятельности
• Ключевые финансовые показатели в динамике
• Проверка по реестрам ФНС

Купить Пример

СПАРК-Профиль

Отчет с полной информацией
из СПАРК

999₽

Включен мониторинг изменений на год

• Регистрационные данные компании
• История изменения руководителей, наименования, адреса
• Полный список адресов, телефонов, сайтов
• Данные о совладельцах из различных источников
• Связанные компании
• Сведения о деятельности
• Финансовая отчетность за несколько лет
• Оценка финансового состояния

Купить Пример

Представителю
компании

бесплатно

Ваша компания?

Повысить доверие

СПАРК-Риски для 1С

Оценка надежности
и мониторинг контрагентов

Заявка на демо-доступ

Заявки с указанием корпоративных email рассматриваются быстрее.

Вход в систему будет возможен только с IP-адреса, с которого подали заявку.

Компания

Телефон

Вышлем код подтверждения

Эл. почта

Вышлем ссылку для входа

Нажимая кнопку, вы соглашаетесь с правилами использования и обработкой персональных данных

ГБОУ СОШ №149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА – Санкт-Петербург – Директор

ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ СРЕДНЯЯ ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНАЯ ШКОЛА №149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА

Организация зарегистрирована 3 февраля 1995 года

Действующее юридическое лицо

ОГРН 1027802499152    от 18.11.2002

ИНН 7804087205  

КПП 780401001  

Налоговый орган

Межрайонная инспекция ФНС №15 по Санкт-Петербургу

Виды экономической деятельности

Образование основное общее + еще 3

Юридический адрес

195256, г. Санкт-Петербург, ул. Черкасова, д. 4, корп. 2, литер А

Директор

Степанова Елена Вадимовна

ИНН 780209114024  

с 17 октября 2006 года

Организационно-правовая форма

Государственные бюджетные учреждения субъектов Российской Федерации

Единый реестр субъектов малого и среднего предпринимательства

Не входит в реестр

Специальный налоговый режим

Не применяется

Среднесписочная численность работников

Нет данных

---

---

Организация зарегистрирована 28 лет назад

В составе исполнительных органов нет дисквалифицированных лиц

Нет массовых руководителей

Нет массовых учредителей

+78125311339, +78125322277, +78125760149, +78125769965

[email protected]

www.школа149.рф

Нет сведений о финансовой отчетности ГБОУ СОШ №149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА

• РФ, субъекты РФ и муниципальные образования (1)

1.	Субъект РФ САНКТ-ПЕТЕРБУРГ Г с 21 сентября 2015 года

• Связи через руководителя (1)

1 организация, связанная через руководителя ГБОУ СОШ №149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА

1.	БЛАГОТВОРИТЕЛЬНЫЙ ФОНД “ВЗОР” Предоставление прочих финансовых услуг, кроме услуг по страхованию и пенсионному обеспечению, не включенных в другие группировки Учредитель — Степанова Елена Вадимовна

1.	№ 78П01 0006390, ПРИЛОЖЕНИЕ 4 К ЛИЦ.№ 0507 от 23 июня 2017 года Образовательная деятельность, осуществляемая образовательными организациями, организациями, осуществляющими обучение, а также индивидуальными предпринимателями, за исключением индивидуальных предпринимателей, осуществляющих образовательную деятельность непосредственно, лицензирование которой осуществляют органы исполнительной власти субъектов Российской Федерации, осуществляющие переданные полномочия Российской Федерации в сфере образования
2.	№ 78П01 БЛАНК № 0004394 от 16 февраля 2016 года Образовательная деятельность, осуществляемая образовательными организациями, организациями, осуществляющими обучение, а также индивидуальными предпринимателями, за исключением индивидуальных предпринимателей, осуществляющих образовательную деятельность непосредственно, лицензирование которой осуществляют органы исполнительной власти субъектов Российской Федерации, осуществляющие переданные полномочия Российской Федерации в сфере образования
3.	№ 78Л01 № 000520 РЕГ. 0507 от 28 мая 2013 года ОБРАЗОВАТЕЛЬНАЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ (за исключением указанной деятельности, осуществляемой негосударственными образовательными учреждениями, находящимися на территории инновационного центра “Сколково”)

В базе данных ФГИС ЕРП Генеральной Прокуратуры РФ найдены 22 проверки в отношении ГБОУ СОШ №149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА

С нарушениями		Без нарушений		Нет данных о результатах
5	22. 73%	13	59.09%	4	18.18%

Последняя проверка

№ 78210041000100509955 от 18 августа 2021 года

Все проверки (22)

…

18 ноября 2002 года Присвоен ОГРН 1027802499152

21 сентября 2015 года Изменения в составе учредителей   – ТЕРРИТОРИАЛЬНОЕ УПРАВЛЕНИЕ КАЛИНИНСКОГО АДМИНИСТРАТИВНОГО РАЙОНА   + САНКТ-ПЕТЕРБУРГ ГОРОД

24 января 2017 года Изменения в составе учредителей   + Неуказанный субъект РФ   – САНКТ-ПЕТЕРБУРГ ГОРОД

31 января 2017 года Изменения в составе учредителей   + Санкт-Петербург г   – Неуказанный субъект РФ

19 сентября 2022 года Сокращенное наименование юридического лица изменено с ГБОУ СОШ № 149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА на

Все изменения (6)

Согласно данным ЕГРЮЛ, организация ГБОУ СОШ №149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА — или ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ СРЕДНЯЯ ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНАЯ ШКОЛА №149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА — зарегистрирована 3 февраля 1995 года по адресу 195256, г. Санкт-Петербург, ул. Черкасова, д. 4, корп. 2, литер А. Налоговый орган — межрайонная инспекция Федеральной налоговой службы №15 по Санкт-Петербургу.

Реквизиты юридического лица — ОГРН 1027802499152, ИНН 7804087205, КПП 780401001. Регистрационный номер в ПФР — 088005013773, регистрационный номер в ФСС — 782200061178151. Организационно-правовой формой является “Государственные бюджетные учреждения субъектов Российской Федерации”.

Основным видом деятельности ГБОУ СОШ №149 КАЛИНИНСКОГО РАЙОНА САНКТ-ПЕТЕРБУРГА является “Образование основное общее”. Организация также зарегистрирована в таких категориях ОКВЭД как “Образование дополнительное детей и взрослых”, “Образование начальное общее”, “Образование среднее общее”.

Директор — Степанова Елена Вадимовна.

На 8 декабря 2022 года юридическое лицо является действующим.

пс. 149 Дэнни Кэй

Обзор Качество школы Отчеты

Обзор

• Номер школы: K149

• Доступность: Нет доступности

• Классы: ПК, 0К, 01, 02, 03, 04, 05, SE

• 2020–2021 Зачисление: 494

• Географический район: 19

• Район: Бруклин

Контакты и информация школы

Руководитель школы

Ивет Дональд, директор

Родительский координатор

D Уайт, Иветт Дональд

Уважение ко всем связям

Лорианна Страчан

Связной по вопросам предотвращения сексуальных домогательств

Лорианна Страчан

Как сообщить о дискриминации между учащимися, сексуальных и других домогательствах, запугивании и издевательствах

Космос

Не используется совместно

Район №

19К149

Суперинтендант и окружные контакты

Суперинтендант

Тамра Коллинз

Координатор поддержки семьи

Джинова Родригес

Телефон

718-240-2700

Адрес

590 Шеффилд-авеню, Бруклин, Нью-Йорк 11207

Президент Совета по образованию

Джойс Френч

Телефон Совета по образованию

718-240-2743

Психическое здоровье и благополучие

Обратитесь к координатору по работе с родителями, школьному социальному работнику или школьному консультанту за дополнительной информацией о программе психического здоровья вашей школы.

Общественная школа

Доктор Бриттани Герберт: 718-688-7620, [email protected]

Информация о вентиляции здания

В целях обеспечения максимальной безопасности персонала и учащихся все школьные здания постоянно контролируются на наличие проблем с вентиляцией. DOE делает ремонт или улучшения там, где это необходимо, и/или закрывает все комнаты до тех пор, пока их можно будет безопасно заселить.

K149 – 700 Саттер Авеню

K848 – Пенсильвания-авеню, 373

См. общегородскую информацию и определения отчетов:

Состояние вентиляции здания

Бесплатное студенческое питание

Завтрак, обед и послешкольное питание бесплатны для всех учащихся государственных школ Нью-Йорка.

Особенности службы меню

• Время завтрака: 8:00–8:30
• Время обеда: 10:40–13:10
• Менеджер службы питания: Дженин Холл
• Номер телефона кухни: 718-688-7642

Посмотреть, что в меню:

Завтрак

Обед

Отчет об инспекции Департамента здравоохранения

Прием

Для информации о поступлении в школу

Просмотрите школы Нью-Йорка на MySchools.nyc

School Quality

DOE разрабатывает инструменты, помогающие семьям и педагогам понять успеваемость учащихся и качество школы. Отчеты на этой странице предоставляют информацию о качестве школы из нескольких источников. Эти источники включают отзывы учащихся, учителей и родителей. Отчеты также включают информацию об официальных посещениях школы и различные показатели успеваемости учащихся.

Снимок качества школы

Сводка качества школы предоставляет семьям краткую информацию о каждой школе. Данные фиксируют школьную учебную среду и успеваемость учащихся. Снимки за 2016-2017 и 2017-2018 учебные годы доступны по ссылкам ниже.

Сводка качества школы — начальная школа

Сводка по качеству школы — дошкольное образование

Руководство по качеству для школ

Руководство по обеспечению качества в школах представляет собой подробный отчет об этой школе, включающий полные результаты опроса школ г. Нью-Йорка и дополнительную информацию об успеваемости учащихся.

Руководство по обеспечению качества в школах — начальная школа

Отчет о проверке качества

Отчет о проверке качества является результатом двухдневного визита опытного преподавателя, который оценил, насколько хорошо эта школа поддерживает обучение учащихся и практику учителей.

Отчет о проверке качества за 2016-2017 гг.

Отчет о проверке качества за 2015-2016 гг.

Информационная панель школьной успеваемости

Информационная панель успеваемости школы показывает данные за несколько лет и ключевые сравнения для этой школы.

Панель успеваемости школы — начальная школа

Отчеты

Создание профиля доступности

Корпус 1

K149 – Саттер-авеню, 700 – нет доступа

Рейтинг

В настоящее время нет BAP

Корпус 2

K848 – 373 Pennsylvania Ave – Нет доступа

Рейтинг

В настоящее время нет BAP

Удобства

Отчеты об испытаниях воды и экологических отчетах

Основная ежегодная космическая съемка

Оценка состояния здания (BCAS)

Бюджет и финансы

Обзор справедливого финансирования студентов

Справедливая информация о финансировании студентов

Галактика Распределение

Сводка бюджета

Отчет о расходах

Искусство

Искусство в школьном отчете

Комплексный образовательный план

Комплексный образовательный план

План школьного консультирования

План школьного консультирования

Молекулы HLA класса I совместно с интегрином β4 стимулируют пролиферацию и миграцию эндотелиальных клеток

. 2010 23 ноября; 3(149):ra85.

doi: 10.1126/scisignal.2001158.

Сяохай Чжан ¹ , Энрике Розенгурт, Элейн Ф Рид

Принадлежности

принадлежность

• ¹ Центр иммуногенетики, кафедра патологии и лабораторной медицины, Медицинская школа Дэвида Геффена, Калифорнийский университет, Лос-Анджелес, Калифорния, США.

• PMID: 21098729
• PMCID: PMC3878299
• DOI: 10.1126/scisignal.2001158

Бесплатная статья ЧВК

Сяохай Чжан и др. Научный сигнал. 2010 .

Бесплатная статья ЧВК

. 2010 23 ноября; 3(149):ra85.

doi: 10.1126/scisignal.2001158.

Авторы

Сяохай Чжан ¹ , Энрике Розенгурт, Элейн Ф. Рид

принадлежность

• ¹ Центр иммуногенетики, кафедра патологии и лабораторной медицины, Медицинская школа Дэвида Геффена, Калифорнийский университет, Лос-Анджелес, Калифорния, США.

• PMID: 21098729
• PMCID: PMC3878299
• DOI: 10. 1126/scisignal.2001158

Абстрактный

Среди реципиентов трансплантата те, у кого вырабатываются антитела против антигенов лейкоцитов человека (HLA) донора, подвергаются более высокому риску опосредованного антителами отторжения и васкулопатии трансплантата, которая представляет собой прогрессирующее сосудисто-окклюзионное заболевание, приводящее к ишемическому повреждению и ухудшению функции органа. Считается, что антитела против молекул HLA класса I (HLA-I) способствуют васкулопатии трансплантата, запуская сигналы, которые вызывают активацию и пролиферацию эндотелиальных клеток. Здесь мы демонстрируем молекулярную связь между HLA-I и субъединицей интегрина β (4) после стимуляции эндотелиальных клеток HLA-I-специфичными антителами. Нокдаун интегрина β(4) в этих клетках аннулировал способность HLA-I стимулировать фосфорилирование киназ Akt, киназы, регулируемой внеклеточным сигналом (ERK) и Src, а также клеточную пролиферацию. Сходным образом снижение содержания HLA-I подавляло опосредованное интегрином β(4) фосфорилирование ERK и миграцию эндотелиальных клеток на ламинин-5, компонент внеклеточного матрикса. Эти результаты указывают на взаимную зависимость между HLA-I и субъединицей интегрина β(4) для стимуляции пролиферации и миграции эндотелиальных клеток, что может иметь важное значение для развития васкулопатии трансплантата и ангиогенеза опухоли.

Заявление о конфликте интересов

Конкурирующие интересы: Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.

Цифры

Рис. 1

Лигирование HLA-I на эндотелиальном…

Рис. 1

Лигирование HLA-I на эндотелиальных клетках вызывает образование комплекса, содержащего…

рисунок 1

Лигирование HLA-I на эндотелиальных клетках вызывает образование комплекса, содержащего субъединицу интегрина β ₄ и HLA-I. ( A ) Эндотелиальные клетки (EC1) стимулировали фрагментами F(ab’) ₂ W6/32 (антитело против HLA-I) или контрольным IgG. Клеточные лизаты подвергали иммунопреципитации (ИП) с помощью W6/32 и анализировали вестерн-блоттингом с антителами против тяжелой цепи HLA-I (EMR8-5) и интегринами β 9.0386 4 , β ₁ , β ₃ и β ₅ , как указано слева от пятен. Для каждого образца в качестве входного контроля загружали 10% всего клеточного лизата, использованного при иммунопреципитации. Данные представляют из трех независимых экспериментов. ( B ) Эндотелиальные клетки (EC1) стимулировали, как описано в (A), лизаты подвергали иммунопреципитации с антителом против HLA-A2, и образцы анализировали вестерн-блоттингом с антителами против тяжелой цепи HLA-I (EMR8 -5) и интегрины β ₄ (205 кДа), β ₁ (130 кДа), β ₃ (105 кДа) и β ₅ (88 кДа). Для каждого образца в качестве входного контроля загружали 2,5% всего клеточного лизата, использованного в реакции иммунопреципитации. Данные являются репрезентативными для двух независимых экспериментов. ( C ) Клетки (EC3) стимулировали, как описано в (A), лизаты подвергали иммунопреципитации с антителом против субъединицы β ₄ интегрина, и образцы анализировали вестерн-блоттингом с EMR8-5 или антителом против интегрина β ₄ . Для каждого образца в качестве входного контроля загружали 5% всего клеточного лизата, использованного в реакции иммунопреципитации. Данные являются репрезентативными для четырех независимых экспериментов. ( D ) Содержание интегринов на поверхности анализировали с помощью проточной цитометрии. Неокрашенные контрольные клетки показаны как закрашенный пик. Толстые, тонкие и пунктирные линии представляют поверхностную экспрессию интегринов β ₄ , β ₃ и β ₁ соответственно. Данные являются репрезентативными для четырех независимых экспериментов. ( E ) Инкубация эндотелиальных клеток (EC1) с антителами против внеклеточных доменов HLA-I (зеленый) и интегрином β ₄ (красный). Последняя панель представляет собой увеличенное поле, обозначенное белым квадратом на объединенном изображении. Локализация как HLA-I, так и интегрина β ₄ на базальной мембране положительно коррелирует, на что указывает коэффициент корреляции ( r ) 0,63 и 0,72 для объединенного изображения и области в рамке, соответственно. Шкала баров, 20 мкм. Данные являются репрезентативными для четырех независимых экспериментов.

Рис. 2

Цитоплазматический домен…

Рис. 2

Цитоплазматический домен тяжелой цепи HLA-I опосредует взаимодействие между HLA-I…

Рис. 2

Цитоплазматический домен тяжелой цепи HLA-I опосредует взаимодействие между HLA-I и интегрином β ₄ . ( A ) Схематическое изображение мутантных молекул HLA-A2, у которых внеклеточный (E-HLA-A2) или цитоплазматический (C-HLA-A2) домены удалены и заменены GFP. ( B ) Эндотелиальные клетки инфицировали аденовирусами, кодирующими либо E-HLA-A2, либо C-HLA-A2. Более 90% инфицированных клеток содержали мутантные белки, что определялось проточным цитометрическим анализом GFP. Данные являются репрезентативными для 10 независимых экспериментов. ( C ) Эндотелиальные клетки, содержащие E-HLA-A2 или C-HLA-A2, стимулировали антителами против HLA-A2 или GFP, клетки лизировали и подвергали иммунопреципитации шариками сефарозы, конъюгированными с антителами против интегрина β ₄ , и образцы анализировали вестерн-блоттингом с антителом против GFP. В этих экспериментах использовали эндотелиальные клетки донора EC2. Для каждого образца в качестве входного контроля загружали 10% всего клеточного лизата, использованного при иммунопреципитации. Данные представляют из трех независимых экспериментов.

Рис. 3

Нокдаун интегрина β _4…

Рис. 3

Нокдаун интегрина β ₄ ингибирует опосредованное HLA-I фосфорилирование целевых белков в эндотелии…

Рис. 3

Нокдаун интегрина β ₄ ингибирует опосредованное HLA-I фосфорилирование белков-мишеней в эндотелиальных клетках. ( A ) Эндотелиальные клетки трансфицировали 100 нМ одиночной дуплексной siRNA против субъединицы интегрина β ₄ (последовательность: 5′-GAGAGCAGCUUCCAAAUCA-3′) или контрольной siRNA и инкубировали в течение 24, 48 или 72 часов. Клетки лизировали и подвергали вестерн-блоттингу с антителами против интегрина β 9.0386 4 , mTOR, FAK, Src, Akt, ERK и β ₂ -микроглобулин, причем β-тубулин служит в качестве контроля загрузки. ( B ) Экспрессию HLA-I на поверхности эндотелиальных клеток, трансфицированных siRNA, анализировали с помощью проточной цитометрии с HLA-I-специфическим антителом W6/32. Отрицательные контрольные клетки показаны в виде заштрихованного пика, тогда как тонкие, толстые и пунктирные линии представляют ложно-трансфицированные клетки, клетки, трансфицированные интегрин-β ₄ -специфической миРНК, и клетки, трансфицированные контрольной миРНК, соответственно. ( C ) Эндотелиальные клетки трансфицировали интегрином β ₄ -специфической миРНК или контрольной миРНК (по 100 нМ каждого). Через 48 часов клетки стимулировали W6/32 (1 мкг/мл) в течение 20 минут, лизировали и анализировали методом Вестерн-блоттинга с антителами против pAkt (Ser ⁴⁷³ ), pSrc (Tyr ⁴¹⁶ ) и pERK ( Thr ²⁰² /Tyr ²⁰⁴ ). β-Тубулин был обнаружен для определения равной нагрузки. Показанные данные являются репрезентативными для трех независимых экспериментов. ( Д ) Белковые полосы, показанные на (C), были количественно оценены с помощью денситометрии, и результаты выражены как среднее значение ± SEM в процентах от максимальной степени фосфорилирования белка, стимулированного W6/32. В этих экспериментах использовали эндотелиальные клетки (EC1). Данные, представленные в (A)-(C), являются репрезентативными по крайней мере для трех независимых экспериментов. (D) Объединенные данные из трех независимых экспериментов.

Рис. 4

Делеция цитоплазматического домена…

Рис. 4

Делеция цитоплазматического домена тяжелой цепи HLA-I блокирует HLA-I…

Рис. 4

Делеция цитоплазматического домена тяжелой цепи HLA-I блокирует передачу сигналов HLA-I. ( A ) Эндотелиальные клетки (EC1), культивированные в суспензии, стимулировали антителами против интегрина β ₄ сб. Клетки лизировали и анализировали вестерн-блоттингом с антителами против pFAK, pSrc, pAkt и pERK. Был проведен денситометрический анализ, и результаты выражены в процентах от максимальной степени фосфорилирования, стимулированного интегрином β ₄ – специфичным антителом. Данные являются репрезентативными для двух независимых экспериментов. ( B ) Эндотелиальные клетки (EC1), трансфицированные контролем или интегрином β ₄ -специфической миРНК, культивировали в суспензии, стимулировали W6/32 и анализировали вестерн-блоттингом для определения степени фосфорилирования белков-мишеней. Результаты денситометрического анализа выражены в процентах от максимальной степени фосфорилирования, стимулированного W6/32. Данные являются репрезентативными для трех независимых экспериментов. ( C ) Эндотелиальные клетки (EC2) инфицировали аденовирусами, кодирующими E-HLA-A2 или C-HLA-A2, и стимулировали контрольными мышиными IgG (C), W6/32 (W), антителами против HLA-A2 (A ), или антитело против GFP (G). Клетки лизировали и анализировали вестерн-блоттингом с антителами против pAkt, pERK и pSrc. Мембраны также инкубировали с антителом против GFP для определения содержания E-HLA-A2 и C-HLA-A2, а β-тубулин использовали в качестве контроля загрузки. Белковые полосы количественно определяли с помощью денситометрии, и результаты выражали в процентах от максимальной степени фосфорилирования белков-мишеней, стимулированных W6/32, и отображали на гистограммах. Данные представляют из трех независимых экспериментов. ( D ) Эндотелиальные клетки (EC1) трансфицировали контрольной или специфичной к интегрину β ₄ миРНК, стимулировали bFGF и анализировали вестерн-блоттингом для определения степени фосфорилирования ERK. Данные являются репрезентативными для двух независимых экспериментов.

Рис. 5

Интегрин β ₄ требуется…

Рис. 5

Интегрин β ₄ необходим для пролиферации клеток, опосредованной HLA-I. ( A ) Эндотелиальный…

Рис. 5

Интегрин β ₄ необходим для пролиферации клеток, опосредованной HLA-I. ( A ) Эндотелиальные клетки (EC1) трансфицировали контрольной или специфичной к интегрину β ₄ siRNA. Через двадцать четыре часа клетки метили CFSE и стимулировали W6/32 в течение 72 часов. Пролиферацию клеток анализировали с помощью программного обеспечения ModFit LT. Индекс пролиферации представляет собой отношение количества пролиферирующих клеток в тест-культурах к количеству пролиферирующих клеток в контрольных культурах. Данные представлены в виде среднего индекса пролиферации ± SEM из трех независимых экспериментов. * P < 0,05 по однофакторному ANOVA, LSD Фишера. ( B ) Эндотелиальные клетки (EC2) инфицировали аденовирусами, экспрессирующими E-HLA-A2 или C-HLA-A2, и стимулировали антителами против GFP или HLA-A2 в присутствии BrdU в течение ночи. Клетки, стимулированные мышиным IgG или W6/32, служили отрицательным и положительным контролем соответственно. Данные представлены в виде среднего процента BrdU-положительных клеток ± стандартная ошибка среднего по трем независимым экспериментам. График проточной цитометрии одного репрезентативного эксперимента представлен на рис. С3.

Рис. 6

Нокдаун тяжелой цепи…

Рис. 6

Нокдаун тяжелой цепи HLA-I или β ₂ -микроглобулин ингибирует…

Рис. 6

Нокдаун тяжелой цепи HLA-I или β ₂ -микроглобулина ингибирует фосфорилирование ERK в эндотелиальных клетках. ( A ) Численность HLA-I анализировали с помощью проточной цитометрии с пан-реактивным HLA-I-специфическим антителом, W6/32, или аллель-специфическим антителом против HLA-A2 в клетках, которые были трансфицированы контрольной миРНК или с миРНК, специфичными для тяжелой цепи HLA-I или β ₂ -микроглобулина. Отрицательные контрольные клетки показаны в виде закрашенных пиков. ( B ) Численность HLA-I анализировали с помощью проточной цитометрии с антителом против аллель-специфического HLA-B56 в клетках, трансфицированных контрольной siRNA или siRNA против тяжелой цепи HLA-I. Отрицательные контрольные клетки показаны в виде закрашенных пиков. Данные являются репрезентативными для двух независимых экспериментов. ( C ) Эндотелиальные клетки трансфицировали миРНК против тяжелой цепи HLA-I и анализировали вестерн-блоттингом с антителами против интегрина β ₄ , тяжелой цепи HLA-I, ERK и β-тубулина. ( D ) Клетки, трансфицированные миРНК против тяжелой цепи HLA-I или субъединицы интегрина β ₄ , или контрольной миРНК, высевали на чашки, покрытые поли-l-лизином (PL), коллагеном I (Col I) или ламинин-5 (LM-5), после чего их анализировали вестерн-блоттингом с антителами против интегрина β ₄ , pERK и тяжелой цепи HLA-I ( n = 3 эксперимента). ( E ) Клетки трансфицировали β ₂ -микроглобулином-специфической миРНК и анализировали вестерн-блоттингом с антителами против β ₂ -микроглобулина, ERK и тяжелой цепи HLA-I. ( F ) Клетки, трансфицированные β ₂ -микроглобулин-специфической миРНК, высевали на ламинин-5 для имитации фосфорилирования ERK. Клетки анализировали, как описано в (D). Данные, представленные в (A) и (C)-(F), являются репрезентативными для трех независимых экспериментов.

Рис. 7

Нокдаун HLA-I подавляет миграцию…

Рис. 7

Нокдаун HLA-I ингибирует миграцию эндотелиальных клеток. ( A ) Трансфекция клеток…

Рис. 7

Нокдаун HLA-I ингибирует миграцию эндотелиальных клеток. ( А ) Клетки, трансфицированные контрольной миРНК или миРНК против субъединицы β ₄ интегрина или тяжелой цепи HLA-I, высевали на ламинин-5 и стимулировали bFGF, и измеряли их миграцию через искусственную рану. ( B ) Клетки трансфицировали контрольной миРНК или миРНК против субъединицы интегрина β ₄ , тяжелой цепи HLA-I или β ₂ -микроглобулина и предварительно обрабатывали митомицином С для ингибирования клеточной пролиферации перед анализом за их способность мигрировать. Графики показывают средний процент закрытия раны ± стандартная ошибка среднего. * P < 0,05 по однофакторному ANOVA, LSD Фишера ( n = 9 экспериментов). В этих экспериментах использовали эндотелиальные клетки (EC1).

См. это изображение и информацию об авторских правах в PMC

Похожие статьи

• HLA класса I: неожиданная роль в передаче сигналов интегрина β4 в эндотелиальных клетках.

  Чжан С., Рид Э.Ф. Чжан X и др. Хум Иммунол. 2012 дек;73(12):1239-44. doi: 10.1016/j.humimm.2012.06.013. Epub 2012 10 июля. Хум Иммунол. 2012. PMID: 22789625 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

• Сигнальные каскады, запускаемые HLA класса II, вызывают пролиферацию и миграцию эндотелиальных клеток: отношение к опосредованному антителами отторжению трансплантата.

  Джин Ю.П., Валенсуэла Н.М., Чжан С., Розенгурт Э., Рид Э.Ф. Джин Ю.П. и др. Дж Иммунол. 2018 1 апреля; 200(7):2372-2390. doi: 10.4049/jimmunol.1701259. Epub 2018 23 февраля. Дж Иммунол. 2018. PMID: 29475988 Бесплатная статья ЧВК.

• Лигирование антителами молекул человеческого лейкоцитарного антигена класса I стимулирует миграцию и пролиферацию гладкомышечных клеток зависимым от киназы фокальной адгезии образом.

  Ли Ф., Чжан С., Джин Ю.П., Малдер А., Рид Э.Ф. Ли Ф и др. Хум Иммунол. 2011 декабрь; 72 (12): 1150-9. doi: 10.1016/j.humimm.2011.09.004. Epub 2011 1 октября. Хум Иммунол. 2011. PMID: 22001078 Бесплатная статья ЧВК.

• Опосредованная антителами против HLA класса I активация сигнального пути PI3K/Akt и индукция экспрессии Bcl-2 и Bcl-xL в эндотелиальных клетках.

  Jin YP, Fishbein MC, Said JW, Jindra PT, Rajalingam R, Rozengurt E, Reed EF. Джин Ю.П. и др. Хум Иммунол. 2004 г., апрель; 65 (4): 291–302. doi: 10.1016/j.humimm.2004.01.002. Хум Иммунол. 2004. PMID: 15120184

• Орфанный ядерный рецептор TR3/Nur77 улучшает заживление ран, повышая экспрессию интегрина β4.

  Ню Г., Йе Т. , Цинь Л., Бурбон П. М., Чанг С., Чжао С., Ли И., Чжоу Л., Цуй П., Рабиновиц И., Меркурио А. М., Чжао Д., Цзэн Х. Ниу Г и др. FASEB J. 2015 Jan; 29(1):131-40. doi: 10.1096/fj.14-257550. Epub 2014 17 октября. ФАСЭБ Дж. 2015. PMID: 25326539 Бесплатная статья ЧВК.

Посмотреть все похожие статьи

Цитируется

• IGF-1 увеличивает выживаемость линии CD4 ⁺ в 2D-модели совместной культуры тимоцитов/стромальных клеток тимуса.

  де Араужо Виейра Л.Ф., Линс М.П., ​​Порту Ф.Л., Сманиотто С., Дос Сантос Рейс М.Д. де Араужо Виейра Л.Ф. и др. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 18 ноября 2022 г. doi: 10.1007/s11626-022-00730-6. Онлайн перед печатью. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2022. PMID: 36401120

• Фосфорилирование S6RP в перитубулярных капиллярах почечных трансплантатов и циркулирующие донор-специфические антитела HLA.

  Райх-Реге Д., Химено Х., Ллинас-Маллол Л., Менендес С., Бенито Д., Редондо Д., Перес-Саес М.Х., Риера М., Рид Э.Ф., Паскуаль Х., Креспо М. Raïch-Regué D, et al. Front Med (Лозанна). 2022 18 окт;9:988080. doi: 10.3389/fmed.2022.988080. Электронная коллекция 2022. Front Med (Лозанна). 2022. PMID: 36330055 Бесплатная статья ЧВК.

• Перекрестная связь между HLA класса I и TLR4 опосредует поверхностную экспрессию P-селектина и захват моноцитов эндотелиальными клетками человека.

  Джин Ю.П., Неварес-Мехиа Дж., Терри А.К., Соса Р.А., Хейдт С., Валенсуэла Н.М., Розенгурт Э., Рид Э.Ф. Джин Ю.П. и др. Дж Иммунол. 2022 1 октября; 209(7):1359-1369. doi: 10.4049/jimmunol.2200284. Epub 2022 2 сентября. Дж Иммунол. 2022. PMID: 36165200

• Защита трансплантатов от повреждений, опосредованных антителами: от ксенотрансплантации до аллогенной трансплантации, механизмы и терапевтические идеи.

  Кервелла Д., Ле Бас-Бернарде С., Брюно С., Бланчо Г. Кервелла Д. и др. Фронт Иммунол. 2022 5 августа; 13:932242. doi: 10.3389/fimmu.2022.932242. Электронная коллекция 2022. Фронт Иммунол. 2022. PMID: 359

  Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

• Молекулярная подпись хронической васкулопатии, опосредованной антителами, в аллотрансплантатах сердца на новой мышиной модели.

  Цуда Х., Дворина Н., Кеслар К.С., Неварес-Мехиа Дж., Валенсуэла Н.М., Рид Э.Ф., Фэйрчайлд Р.Л., Болдуин В.М. 3-й. Цуда Х и др. Ам Джей Патол. 2022 июль; 192 (7): 1053-1065. doi: 10.1016/j.ajpath.2022.04.003. Epub 2022 29 апр. Ам Джей Патол. 2022. PMID: 354

Просмотреть все статьи “Цитируется по”

Типы публикаций

термины MeSH

• .