Нртк нн: «Нижегородский радиотехнический колледж» | Государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение

, виртуальных эталонных

станциях и FM-вещании на поднесущей», 51-е ежегодное собрание

, 50 лет прогресса в навигации From Art

to Utility, Колорадо-Спрингс, Колорадо, 5–7 июня, стр.

128–139.

NTRIP: Сетевая передача RTCM через Интернет

Протокол [онлайн],

http: // igs.bkg.bund.de/index_ntrip.htm [доступ

14 сентября 2009 г.].

Ретчер, Г. (2002), «Показатели точности виртуальных сетей опорных станций

(VRS)», журнал

Global Positioning Systems, 1 (1): 40-47.

RTCM: Радиотехническая комиссия для морских служб

[онлайн] http://www.rtcm.org [доступ

14 сентября 2009].

Rizos, C., (2002), «Исследование сети RTK и реализация

: геодезическая перспектива», журнал

Global Positioning Systems, 1 (2): 144-150.

Rizos, C, Han S.W. (2003) «Сеть базовых станций

на основе систем RTK – концепции и прогресс», Ухань

University Journal of Natural Sciences, 8 (2B): 566-

574.

Rizos, C. (2007), «Альтернативы. к текущим услугам GPS-RTK

и некоторым последствиям для инфраструктуры и операций CORS

», GPS Solutions, 11:

151–158.

SAPOS®: [онлайн] http://www.sapos.de. [Доступ 14

сентября 2009 г.].

Han, SW. (1997), «Кинематическое позиционирование GPS

на основе фазы несущей», докторская диссертация, представитель

UNISURV S-49, Школа геоматической инженерии,

Университет Нового Южного Уэльса, Сидней.

Han, S.W. и Ризос, К. (1996), «Проектирование сети GPS

и устранение ошибок для системы мониторинга непрерывных массивов

в реальном времени», 9-е международное техническое совещание спутникового подразделения

Соединенного Королевства.S. Inst. of Navigation,

Kansas City, Missouri, 17-20 сентября, стр. 1827–

1836.

Hoffmann-Wellenhof, B., Lichtenegger, H., Collins, J.

(2001), GPS Theory and Практика, пятое издание,

Springer-Verlag, Wien New York.

Ху, Г. Р., Ху, Х. С., Го, П. К., Закон, К. Л. (2003),

«Разработка и оценка виртуальных опорных станций GPS

для RTK-позиционирования», журнал

Geodesy, 77: 292–302.

Ху, Г. Р., Ху, Х. С., Го, П. К., Закон, К. Л. (2002a),

«Тестирование Сингапурской интегрированной сети множественных опорных точек

(SIMRSN) для точного быстрого статического позиционирования

», Европейская навигационная конференция –

GNSS2002, Копенгаген, Дания, 27–30 мая,

CD- ROM proc.

Hu, G.R., Kho, o H.S., Goh, P.C., Law, C.L. (2002b),

«Интернет-позиционирование GPS VRS RTK с помощью сети с несколькими опорными станциями

», журнал

Global Positioning Systems, 1 (2): 113-120.

передача сигналов, терапевтическое значение и проблемы

Abstract

Рак молочной железы является многофакторным заболеванием, которое обусловлено аберрантной регуляцией клеточных сигнальных путей из-за приобретения генетических и эпигенетических изменений. Множество факторов роста и их рецепторов участвует в развитии и метастазировании рака. Рецепторные тирозинкиназы (RTK) составляют класс рецепторов, которые играют важную роль в прогрессировании рака. RTK представляют собой рецепторы клеточной поверхности со специализированными структурными и биологическими особенностями, которые реагируют на сигналы окружающей среды, инициируя соответствующие сигнальные каскады в опухолевых клетках.Известно, что RTK регулируют различные нижестоящие сигнальные пути, такие как MAPK, PI3K / Akt и JAK / STAT. Эти пути играют ключевую роль в регуляции стволовости рака, ангиогенеза и метастазирования. Эти пути также необходимы для взаимного взаимодействия опухолевых и стромальных клеток. Многогранная роль RTK делает их пригодными для лечения рака груди. Однако структурные мутации, амплификация генов и активация альтернативного пути создают проблемы для терапии против RTK.

Ключевые слова: Рак Бреста, Опухолевая микросреда, Ангиогенез, Стволовые раковые клетки, Взаимодействие опухоль-строма, Метастаз, Анти-RTK терапия, Лекарственная устойчивость, Лапатиниб, Трастузумаб, Бевацизумаб, Активация альтернативного пути

Фон

Рак молочной железы основная причина заболеваемости и смертности среди женщин во всем мире.Заболеваемость раком груди во всем мире значительно различается. Ожидается, что это затронет 0,2 миллиона человек и приведет к примерно 41 070 смертельным исходам в США в 2017 году [1]. Рак груди возникает как следствие нарушения регуляции различных сигнальных путей в эпителиальных клетках молочной железы. Факторы роста и хемокины активируют различные сигнальные каскады, которые взаимодействуют в микроокружении опухоли, что приводит к прогрессированию рака. Они связываются с разными семействами рецепторов. Рецепторные тирозинкиназы (RTK) составляют одно такое семейство.RTK представляют собой однопроходные трансмембранные белки, экспрессируемые на различных типах клеток, в том числе в микроокружении опухоли. Сверхэкспрессия различных типов RTK, таких как рецепторы эпидермального фактора роста (EGFR), рецепторы сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGFR), рецепторы тромбоцитарного фактора роста (PDGFR), рецепторы инсулиноподобного фактора роста (IGFR) и рецепторы фактора роста фибробластов (FGFR) обнаруживается при различных типах рака, включая рак груди [2–4]. Повышенные уровни RTK связаны с повышенной агрессивностью рака груди и снижением общей выживаемости и выживаемости без болезней [5].Связывание лиганда приводит к конформационным изменениям в RTK, что приводит к активации нижестоящих сигнальных молекул. Важные пути, которые, как известно, активируются RTK, включают митоген-активируемую протеинкиназу (MAPK), Janus-киназу (JAK) / сигнальный преобразователь и активатор транскрипции (STAT) и фосфоинозитид-3-киназу (PI3K) / Akt [6-10 ]. Пути, регулируемые RTK, играют ключевую роль в различных аспектах прогрессирования рака. RTK-активированная передача сигналов также индуцирует фенотип раковых стволовых клеток (CSC), которые проявляют устойчивость к терапевтическим режимам [6, 9].Прогрессирование рака регулируется не только автономными сигнальными сетями, но и контекстно-зависимыми молекулярными сигналами, получаемыми от стромы опухоли. Строма опухоли состоит из различных типов незлокачественных клеток, таких как фибробласты, эндотелиальные клетки, макрофаги и другие иммунные клетки [11]. Регулируемое передачей сигналов RTK взаимодействие между опухолевыми и стромальными клетками способствует ремоделированию тканей, привлечению и активации стромальных клеток. Выживание диссеминированных раковых клеток в местах метастазирования требует формирования дометастатической ниши стромальными клетками.Стромальные клетки, экспрессирующие RTKs, как известно, рекрутируются в метастатические сайты и, как было обнаружено, образуют дометастатическую нишу посредством регулируемой RTK передачи сигналов [8]. RTK также регулируют трансдифференцировку раковых клеток в эндотелиальные клетки с образованием новых кровеносных сосудов в процессе, известном как васкулогенная мимикрия [12, 13]. Поскольку RTK играют важную роль в различных аспектах прогрессирования рака груди, нацеливание на RTK может быть полезно при лечении рака. За прошедшие годы несколько ингибиторов RTK прошли скрининг и прошли клинические испытания.Некоторые из них, такие как лапатиниб, трастузумаб и бевацизумаб, были одобрены Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) США для клинического лечения рака груди. Интересно, что ингибиторы RTK возвращают традиционную вызванную терапией множественную лекарственную устойчивость и улучшают выживаемость без признаков заболевания у пациентов с метастатическим раком молочной железы [14]. Несмотря на то, что анти-RTK терапия показывает клинические преимущества у пациентов с раком груди, к сожалению, раковые клетки развивают de novo или приобретенную резистентность, которая ограничивает успех RTK-таргетной терапии [15].В этом обзоре мы имеем дело с передачей сигналов EGFR, VEGFR, PDGFR и FGFR при прогрессировании рака груди, поддержании фенотипа раковых стволовых клеток, взаимодействии опухоли со стромой и устойчивости к лекарствам. Кроме того, в этом обзоре также обсуждаются основные проблемы нацеливания на RTK для успешного лечения рака груди.

Структура и классификация RTK

Пятьдесят восемь различных RTK были охарактеризованы у людей, и они были разделены на 20 различных подсемейств на основе структурных особенностей.Каждое подсемейство RTK демонстрирует структурную организацию прототипа вместе с характеристиками, специфичными для класса. Прототип RTK имеет внеклеточный лиганд-связывающий домен и внутриклеточный домен тирозинкиназы, разделенные трансмембранным доменом. Подсемейства RTK: (1) EGFR, (2) InsR, (3) PDGFR, (4) VEGFR, (5) FGFR, (6) PTK7 / CCK4, (7) Trk, (8) Ror, (9) MuSK, (10) Met, (11) Axl, (12) Tie, (13) EphA / B, (14) Ret, (15) Ryk, (16) DDR1 / 2, (17) Ros, (18) LMR , (19) ALK и (20) SuRTK106 / STYK1. Внутриклеточный домен RTK обладает тирозинкиназной активностью (тирозинкиназный домен; TKD).Этот тирозинкиназный домен может фосфорилировать тирозиновые остатки в цис (в пределах той же молекулы) или в транс (находящиеся в другой молекуле) (рис.). Было обнаружено, что этот консенсусный дизайн RTK сохраняется в процессе эволюции. Было обнаружено, что мутации в RTK, приводящие к структурным аномалиям, приводят к различным нарушениям.

Структура прототипа рецепторной тирозинкиназы и механизм активации. Рецепторные тирозинкиназы (RTK) имеют следующие структурные сегменты от N- до C-конца: иммуноглобулиновые складки, трансмембранная область, юкстамембранная область, N-доля, активационная петля, C-доля и цитоплазматический хвост.RTK находятся на плазматической мембране в виде мономера. Связывание лиганда сшивает молекулы рецептора и вызывает конформационные изменения, которые приводят к аутофосфорилированию и активации рецептора. Фосфорилированная RTK либо служит сайтом стыковки для адаптерных белков (B), либо может непосредственно фосфорилировать сигнальные молекулы (A). Адаптерные белки или сигнальные молекулы связываются с фосфорилированным рецептором через Src-гомологичный 2 (Sh3) или фосфотирозин-связывающий домен (PTB) домен. Пристыкованные адаптерные белки дополнительно передают сигнал путем фосфорилирования других нижестоящих молекул (C, D).

RTK активируются связыванием растворимых лигандов.Некоторые из RTK (DDR1, DDR2) активируются не растворимыми лигандами, а коллагеновыми волокнами внеклеточного матрикса [16]. Два обязательных события в активации RTK – это связывание лиганда и димеризация рецептора. Хотя ранее предполагалось, что связывание родственного лиганда в конечном итоге приводит к димеризации рецептора, было обнаружено, что некоторые RTK являются олигомерными даже в отсутствие лигандов [17]. EGFR в основном присутствует в виде мономера, тогда как рецептор инсулина присутствует в виде димера на клеточной мембране [18].Тем не менее, активация рецептора требует связывания лиганда и последующей димеризации или олигомеризации первого в активном состоянии. Различные механизмы димеризации рецепторов, вызванной связыванием лиганда, были объяснены для разных классов RTK разными исследовательскими группами. Механизмы включают две крайности, когда поверхность раздела димеров полностью формируется либо лигандом, либо молекулами рецептора. Два других механизма включают участие как лиганда, так и рецептора в образовании границы раздела димеров и, в другом случае, участие вспомогательной молекулы.Примером первого механизма является активация рецептора фактора роста нервов (NGF), TrkA, где только две молекулы NGF образуют интерфейс димера, и ни один из внеклеточных доменов рецептора не вступает в физический контакт с соседней молекулой [19, 20]. Лиганды, которые активируют членов семейства EGFR, сами по себе не образуют димеры, скорее они связывают два разных домена одной и той же молекулы и вызывают благоприятные конформационные изменения, которые приводят к образованию интерфейса димера молекулами рецептора [21].Фактор стволовых клеток (SCF) связывается со своим рецептором, KIT, и индуцирует димеризацию рецептора, где поверхность раздела димеров формируется как молекулами лиганда, так и рецептора [22]. В случае FGFR молекула гепарина стабилизирует конфигурацию димера FGFR после связывания лиганда (фактора роста фибробластов (FGF)) [23].

В отсутствие родственных лигандов RTK удерживаются в неактивном состоянии с помощью механизмов автоингибирования. Для разных семейств RTK описаны два различных механизма автоингибирования.TKD RTKs содержит три основных элемента: N-лепесток, C-лепесток и петлю активации [24]. В механизме автоингибирования, опосредованном петлей активации, петля активации устанавливает физический контакт с активным сайтом TKD. Критический остаток тирозина в петле активации фосфорилируется, и активность тирозинкиназы аутоингибируется в cis [25]. В другом механизме, юкстамембранные последовательности устанавливают обширный контакт с активным сайтом TKD, и последний арестовывается в аутоингибированной неактивной конформации [26-28].Связывание лиганда вызывает благоприятные конформационные изменения, которые устраняют аутоингибирование после димеризации рецептора. Активированные RTK могут привлекать множество нижестоящих эффекторных молекул. Эти молекулы содержат домены Sh3 или PTB, которые связывают остатки фосфотирозина на RTK [29]. Эти белки могут либо напрямую взаимодействовать с активированными RTK, либо они могут взаимодействовать с другими стыковочными белками, которые фосфорилируются по тирозину с помощью RTK. Некоторые из хорошо известных стыковочных белков, которые организуют образование больших белковых комплексов после активации RTK, представляют собой субстрат рецептора FGF 2 (FRS2), субстрат рецептора инсулина 1 (IRS1) и связующее вещество 1, связанное с Grb2 (Gab1).Некоторые из стыковочных белков обладают специфичностью в отношении того, какие классы RTK они связывают, тогда как другие стыковочные белки связывают членов RTK из разных семейств. Один RTK может связывать разные лиганды. EGFR связывает семь различных лигандов [30]. Сила взаимодействия с RTK варьируется для этих разных молекул лиганда. Признаки активной конформации димеризованного рецептора сильно различаются для разных лигандов. Различные активные димерные конформации RTK активируют разные нижестоящие сигнальные каскады [31].Перестройки генов и мутации придают RTK определенные структурные особенности, которые приводят к димеризации и активации рецептора, не зависящим от лиганда. Аберрантная активация RTK такими средствами может привести к различной патофизиологии. Перестройки генов могут приводить к аномальным конформациям спиральной спирали и лейциновой молнии внеклеточного домена, которые индуцируют независимую от лиганда ассоциацию RTK. Мутации, приводящие к образованию остатков цистеина во внеклеточном домене, также могут вызывать постоянную ассоциацию двух мономеров RTK [32].Мутации трансмембранного домена также могут приводить к конститутивной димеризации RTK, что приводит к определенным патофизиологиям [33]. Помимо классификации, изложенной выше, RTK также были классифицированы на основе общности нижестоящей передачи сигналов и паттерна экспрессии в тканях. Три таких класса: (1) EGFR / FGFR1 / c-Met, (2) IGF-1R / NTRK2 и (3) PDGFRβ [34].

Стволовые клетки рака молочной железы и лекарственная устойчивость

Несмотря на появление новых терапевтических подходов, рецидив опухоли остается более сложной проблемой при лечении рака молочной железы.Существуют различные причины рецидива опухоли, включая стволовые клетки рака молочной железы (BCSC), расположенные как в первичной опухоли, так и в местах метастазирования. РСК представляют собой субпопуляцию опухолевых клеток, которые обладают потенциалом к ​​самообновлению и развитию туморогенеза. BCSC характеризуются экспрессией специфических маркеров клеточной поверхности, включая EpCAM ⁺ / CD24 ^– / CD44 ⁺ [35]. Более того, сообщалось, что CSC также экспрессируют высокий уровень альдегиддегидрогеназы (ALDH), и это связано с плохим клиническим исходом [36].Однако недавнее исследование предполагает, что CSC EpCAM ⁺ / CD24 ^– / CD44 ⁺ анатомически отличаются от ALDH + ve CSC. Молекулярное профилирование РСК EpCAM ⁺ / CD24 ^– / CD44 ⁺ и ALDH + ve CSCs показало, что бывшие субпопуляции демонстрируют фенотип покоящегося эпителиального перехода в мезенхимальный (EMT), тогда как ALDH + ve CSCs демонстрируют эпителиальный фенотип с самим собой. -обновляемая емкость [37]. Микроокружение опухоли состоит из ассоциированных с раком фибробластов (CAF), ассоциированных с опухолью макрофагов (TAM), мезенхимальных стволовых клеток (MSC) и других иммунных и сосудистых клеток и участвует в поддержании CSC при раке груди [11, 38].Передача сигналов RTK в опухолевых и стромальных клетках играет решающую роль в регуляции фенотипов CD24 ^– и CD44 ⁺ и ALDH + ve CSC. РСК оказывают большое влияние на терапию рака, поскольку они проявляют устойчивость к обычным химиотерапевтическим средствам за счет экспрессии генов множественной лекарственной устойчивости (МЛУ). Фракция опухолевых клеток CD44 ⁺ / CD24 ^– увеличивается у пациентов с раком груди после проведения неоадъювантной химиотерапии [39]. Более того, химиотерапия на основе паклитаксела и эпирубицина связана с обогащением клеток ALDH + ve в опухолях молочной железы [40].Измененная экспрессия / нарушение регуляции RTK связано с фенотипом BCSC и лекарственной устойчивостью. Несколько сообщений предполагают, что лечение рака груди с помощью терапии на основе RTK обращает вспять множественную лекарственную устойчивость [41–43]. Роль передачи сигналов RTK в регуляции фенотипа CSC и лекарственной устойчивости обсуждается далее.

Роль передачи сигналов рецепторной тирозинкиназы (RTK) в прогрессировании рака молочной железы

EGFR: ключевой регулятор фенотипа раковых стволовых клеток и метастазирования при воспалительном раке молочной железы

EGFR сверхэкспрессируется в тканях рака молочной железы и связан с более высокой агрессивностью и низким клинические исходы [44, 45].EGFR – это классический RTK, который подвергается гомо- или гетеродимеризации и транс-аутофосфорилированию при связывании лиганда. EGFR обладают семью различными родственными лигандами, включая EGF, TGFα, бетацеллулин (BTC), гепарин-связывающий EGF, амфирегулин (AREG), эпирегулин и эпиген. Семейство EGFR состоит из EGFR1 (EGFR, HER1, c-erbB1), HER2 (EGFR2, c-erbB2), EGFR3 (c-erbB3, HER3) и EGFR4 (c-erbB4, HER4) [46, 47]. Виттон и др. изучили экспрессию EGFR1, HER2, EGFR3 и EGFR4 с помощью иммуногистохимии у 220 пациентов с раком груди и обнаружили сверхэкспрессию EGFR1 у 16.4%, HER2 в 22,8%, EGFR3 в 17,5% и EGFR4 в 11,9% тканей рака молочной железы. Повышенная экспрессия EGFR1, HER2 или EGFR3 была связана с уменьшением выживаемости, тогда как повышенный уровень EGFR4 был связан с лучшей выживаемостью пациентов с раком груди. Также сообщалось, что повышенная экспрессия EGFR1, HER2 и EGFR3 была связана со сниженной экспрессией рецептора эстрогена (ER) [48]. После связывания с лигандом EGFR активирует различные сигнальные молекулы, расположенные ниже по течению, включая Ras, PI3K, фосфолипазу C-γ (PLC-γ) и JAK, что приводит к выживанию клеток, росту клеток и прогрессированию опухоли (рис.) [6, 49, 50]. Различные исследования показали, что экспрессия ER обратно коррелирует с EGFR или фенотипом раковых стволовых клеток, и это хорошо подтверждается данными, которые указывают на более высокую экспрессию EGFR и присутствие популяции стволовых клеток в TNBC, которые лишены экспрессии ER [51]. Чтобы исследовать, регулирует ли EGFR стволовость при раке груди, Wise et al. изучили обогащение раковых стволовых клеток при активации EGFR. Они обнаружили, что металлопротеиназозависимая активация EGFR обогащает стволовые клетки CD44 ⁺ / CD24 ^– в TNBC через путь MAPK / ERK (рис.) [6]. Воспалительный рак молочной железы (особенно воспалительный TNBC) – более летальная и агрессивная форма рака молочной железы, характеризующаяся обогащением химио- и радиоустойчивых РСК [52, 53]. Различные сообщения предполагают, что передача сигналов EGFR важна для патогенеза и прогрессирования IBC [54, 55]. Активация NF-κB в IBC приводит к подавлению регуляции ER и сверхэкспрессии EGFR и / или ErbB2 и гиперактивации MAPK. Сигнатура MAPK отличает IBC от опухолей, отличных от IBC, лучше, чем стратификация на основе ER (54).Wang et al. определили, что EGFR / cyclooxygenase-2 (COX-2) ось регулируемая узловая передача сигналов способствует фенотипу CSC и увеличивает инвазивность клеток IBC посредством индукции EMT (Fig.) [55]. Программа EMT, вызванная TGF-β, увеличивает экспрессию RTK, таких как EGFR и IGF-1R, которые образуют цитоплазматические комплексы с ER-α и Src, что приводит к устойчивости к антиэстрогенам при раке молочной железы [56]. Синдекан-1 (CD138) сверхэкспрессируется и связан с пролиферацией и инвазией клеток, и стал важной лекарственной мишенью при IBC.Ибрагим и др. установили связь между Syndecan-1 и EGFR в регуляции фенотипа раковых стволовых клеток при воспалительном TNBC. Их исследования показали, что Syndecan-1 регулирует экспрессию EGFR посредством активации передачи сигналов Notch. Перекрестные помехи Syndecan-1 / Notch / EGFR модулируют экспрессию интерлейкина-6 (IL-6), gp130 и других воспалительных цитокинов, тем самым способствуя образованию колоний и экспрессии маркеров стволовых клеток посредством Akt-опосредованной активации NFκB (рис.) [9].

RTK-регулируемая передача сигналов при прогрессировании рака груди.VEGFR активирует сигнальный путь JAK / STAT для индукции фенотипа раковых стволовых клеток посредством экспрессии Myc и Sox2. Мутантный p53 индуцирует экспрессию VEGFR за счет взаимодействия с комплексом SWI / SNF. EGFR-регулируемая передача сигналов также играет ключевую роль в ангиогенезе и метастазировании. EGFR регулирует активацию сигнальных путей JAK / STAT и MAPK, чтобы индуцировать экспрессию Sox2 и других маркеров стволовых клеток, что приводит к обогащению раковых стволовых клеток. EGFR индуцирует фосфорилирование Akt, что способствует воспалению.PDGFR экспрессируется на стромальных клетках, таких как фибробласты, и является маркером активации фибробластов. Активация STAT, регулируемая PDGFR, участвует в регуляции опосредованной miR-9 дифференцировки раковых клеток в эндотелиальные клетки, что приводит к ангиогенезу. Активированный FGFR путь MAPK индуцирует фенотип EMT и CSC. Сотрудничество между FGFR и HER2 регулирует ядерную транслокацию Cyclin D1, приводящую к усилению пролиферации раковых клеток

Аутофагия играет обоюдоострую роль в прогрессировании опухоли в зависимости от контекста опухоли.Недавнее исследование показало, что аутофагия регулирует обогащение ALDH + ve раковых стволовых клеток посредством передачи сигналов EGFR / Stat3 при PyMT при раке молочной железы у мышей (рис.) [57]. Строма опухоли также индуцирует фенотип раковых стволовых клеток, взаимодействуя с EGFR, который присутствует на раковых клетках через различных нижестоящих молекулярных игроков [58]. В аналогичной строке доказательств Yang et al. сообщили, что активация EGFR в раковых клетках с помощью ТАМ приводит к Stat3-опосредованной экспрессии Sox2, что приводит к увеличению популяции раковых стволовых клеток и метастазированию в моделях рака груди у мышей (рис.) [59].

VEGFR: главные узлы в регулируемых VEGF метастазах, ангиогенезе опухолей и лимфангиогенезе

Различные исследования установили, что ангиогенез необходим для прогрессирования опухоли молочной железы. VEGF являются мощными проангиогенными факторами, которые связываются с тремя различными типами VEGFR, VEGFR1 (Flt1), VEGFR2 (KDR или гомолог мыши, Flk1). VEGFR экспрессируются на раковых, эндотелиальных и других стромальных клетках. VEGFR представляют собой типичные RTK, содержащие внеклеточный домен для связывания лиганда, трансмембранный домен и цитоплазматический домен, который включает домен тирозинкиназы (TKD) [38].VEGF-A связывается как с VEGFR1, так и с VEGFR2, чтобы индуцировать ангиогенез опухоли, тогда как VEGF-C и D взаимодействуют с VEGFR3, способствуя лимфангиогенезу при различных типах рака [38, 60]. Однако Лаакконен и др. сообщили, что регулируемая VEGF-C и VEGF-D передача сигналов VEGFR3 индуцирует ангиогенез опухоли [61]. Чакраборти и др. показали, что остеопонтин (OPN) увеличивает экспрессию VEGF-A в клетках рака груди и индуцирует рост опухоли и ангиогенез путем регулирования аутокринной, паракринной и юкстакринной передачи сигналов VEGF / VEGFR в раковых и эндотелиальных клетках [62].Srabovic et al. сообщили, что экспрессия VEGFR1 значительно увеличивается в тканях опухоли груди по сравнению с доброкачественными опухолями или здоровыми окружающими тканями, независимо от статуса метастазов в лимфатические узлы [63]. Kosaka et al. идентифицировали повышенные уровни мРНК VEGFR1 в периферической крови пациентов с раком молочной железы, что связано с метастазированием и рецидивом рака и может быть использовано для прогноза рака молочной железы с заболеваниями базального и просветного типа [64]. В недавнем исследовании Kapahi et al.выявили, что полиморфизм VEGFR1-710C / T связан с более высоким риском рака груди у населения Северной Индии [65]. Ning et al. показали, что активация VEGFR1 индуцирует EMT раковых клеток, тем самым способствуя инвазии и метастазированию в моделях рака груди [66]. Накопленные данные свидетельствуют о том, что инфильтрованные макрофаги в микросреде опухоли способствуют злокачественному прогрессированию и усиливают метастазирование [11, 67]. В недавнем сообщении было высказано предположение, что передача сигналов VEGFR1 регулирует индуцированный ожирением туморогенез.Удаление VEGF1 у тучных животных снижает рост рака груди и метастазирование в легкие за счет уменьшения поляризации макрофагов M2 и воздействия на метаболизм глюкозы (рис.) [67]. Недавние данные свидетельствуют о том, что Flt1 + ve связанные с метастазами макрофаги (МАМ), подмножество ТАМ, более подвержены метастатическому раку молочной железы по сравнению с первичными опухолями. Передача сигналов Flt1 в МАМ регулирует набор воспалительных генов, необходимых для выживания раковых клеток после метастатического посева. Кроме того, циркулирующие миелоидные клетки VEGFR1 + ve участвуют в формировании дометастатических ниш [8, 68].CYP4A поляризованные ТАМ стимулируют образование дометастатических ниш и метастазирование в легких путем мобилизации и рекрутирования миелоидных клеток VEGFR1 + ve (рис.) [68]. VEGR-2 является ключевым регулятором ангиогенеза и сверхэкспрессируется в тканях рака груди [69]. Пфистер и др. изучили активацию экспрессии гена VEGFR2 мутантным p53 при трижды отрицательном раке молочной железы. В этом исследовании они показали, что мутантный p53 взаимодействует с SWI / SNF и рекрутируется на промотор VEGFR2, где этот комплекс ремоделирует промотор VEGFR2 и индуцирует транскрипцию, приводящую к VEGFR-опосредованному прогрессированию опухоли молочной железы.Эти результаты показывают, что усиление функции мутантного p53 опосредуется активацией экспрессии VEGFR2 (рис.) [70]. Коллективные данные свидетельствуют о том, что VEGFR2 играет важную роль в метастазировании рака груди. Однако роль VEGFR2 в инвазии и миграции раковых клеток зависит от контекста. В микросреде опухоли молочной железы гипоксия индуцирует образование комплекса интегрина c-Met / β1, что приводит к более высокому потенциалу инвазии и миграции раковых клеток. Однако VEGF-активированный VEGFR2 напрямую связывается с c-Met и интегрином β1 для предотвращения образования комплексов, что приводит к секвестрации c-Met и интегрина β1 [71].Чжао и др. . обнаружили, что VEGF управляет экспрессией VEGFR2 и впоследствии активирует опосредованную передачей сигналов JAK2 / STAT3 экспрессию Myc и Sox2. Основанная на оси VEGF / VEGFR2 аутокринная петля, состоящая из STAT3, Myc и Sox2, участвует в усилении фенотипа раковых стволовых клеток в TNBC (рис.) [10]. Тем не менее, , CSC ответственны за метастазирование раковых клеток, лекарственную устойчивость и рецидив опухоли, нарушение оси VEGFR2 / STAT3 / Myc / Sox2 может быть полезным для преодоления химиорезистентности при тройном отрицательном раке молочной железы.

Лимфангиогенез, образование новых лимфатических сосудов играет важную роль в распространении раковых клеток и отдаленных метастазах. Таким образом, доказано, что лимфангиогенез является многообещающей мишенью для лечения рака груди. Однако отсутствие специфических маркеров для изучения лимфатических сосудов и лимфогенных метастазов задерживает разработку антилимфангиогенной терапии для лечения различных типов рака [72]. VEGFR3 – это RTK, экспрессируемая на лимфатических эндотелиальных клетках (LEC), и она играет ключевую роль в лимфангиогенезе [20].Недавнее исследование показало, что ось хемокинов CCL21 / CCR7, экспрессируемых на клетках рака молочной железы, взаимодействует с VEGFR3, присутствующим на LEC, чтобы индуцировать зависимое от опухоли рекрутирование лимфатических сосудов и тем самым лимфангиогенез при раке груди [73]. Лимфангиогенез также необходим для метастазирования послеродового рака груди. Недавние сообщения предполагают, что ЦОГ-2 индуцирует экспрессию VEGFR3 и лимфангиогенез через ось VEGF-C / VEGFR3, способствуя узловому метастазированию послеродового рака молочной железы [74, 75]. VEGFR3 незаменим для галектин-8-опосредованных перекрестных помех с участием путей VEGF-C, подпланина и интегрина, ведущих к лимфангиогенезу при раке молочной железы [76].Основываясь на вышеизложенных результатах, нацеливание на лимфангиогенез с использованием терапии против VEGFR3 может быть полезным для предотвращения метастазирования опухолевых клеток и увеличения выживаемости пациентов с раком молочной железы.

PDGFR: многообещающая роль во взаимодействии опухоль-строма при карциноме молочной железы

PDGFR представляют собой RTK типа III, которые высоко экспрессируются в опухолях молочной железы и стромальных клетках. Семейство PDGFR состоит из PDGFR-α и β, и оба обладают схожими функциями. PDGFR-α и β структурно подобны и содержат внеклеточный домен, который состоит из пяти иммуноглобулиновых (Ig) -подобных складок и внутриклеточных доменов, которые проявляют киназную активность и состоят из 100 аминокислотных остатков, не похожих на другие RTK.PDGF в основном связываются с Ig-подобными доменами 2 и 3 и вызывают гомо или гетеродимеризацию рецепторов. Более того, эти рецепторы дополнительно стабилизируются за счет прямых взаимодействий рецептор-рецептор через Ig-подобный домен 4 после димеризации [77]. Аберрантная активность PDGFRs при различных типах рака, включая рак груди, способствует онкогенезу. В различных исследованиях сообщалось, что экспрессия PDGFR связана с плохим прогнозом пациентов с раком груди и имеет прогностический и прогностический потенциал [78–80].PDGFR, как известно, регулирует различные нижестоящие сигнальные сети, включая Stat3, для поддержки инициации и прогрессирования опухоли груди [72]. Park et al. сообщили, что вызванная AF1q активация STAT3 усиливает пролиферацию клеток рака груди, ангиогенез и метастазирование через сигнальный каскад PDGFR / Src [7]. Помимо прямой регуляции раковых клеток, PDGFR также экспрессируются в реактивной десмопластической строме, что показывает его возможную роль во взаимодействии опухоль-строма. Bhardwaj et al. обнаружили, что PDGFR экспрессируется α-SMA-положительными миофибробластами (ассоциированные с раком фибробласты, CAF) и эндотелиальными клетками в периэпителиальной строме тканей рака молочной железы (рис.) [79]. Paulsson et al. изучили прогностическую роль экспрессии стромального PDGFR-β с использованием тканевых микрочипов (ТМА) рака молочной железы. Их результаты показали, что стромальный PDGFR-β имеет наиболее важное прогностическое значение в подмножестве опухолей молочной железы. Они также обнаружили, что повышенная экспрессия PDGFR связана со снижением ER и PR и более высокой экспрессией HER2, а также с повышенной скоростью пролиферации и размером опухоли [80]. В аналогичной строке доказательств Pinto et al. показали, что злокачественная строма индуцирует пролиферацию клеток рака молочной железы и ангиогенез в условиях отсутствия эстрогена через сигнальный каскад PDGFR [81].Эти результаты указывают на главную роль PDGFR в прогрессировании рака молочной железы в отсутствие передачи сигналов ER. Это представление дополнительно подтверждается тем фактом, что PDGFR индуцирует эндотелиальную дифференцировку клеток TNBC с использованием моделей ксенотрансплантатов in vitro, и in vivo, . Более того, D’Ippolito et al. очертили молекулярный механизм, с помощью которого PDGFR регулирует эндотелиальную дифференцировку опухолевых клеток в TNBC. PDGFR-индуцированная экспрессия miR-9 способствует васкулогенным свойствам, воздействуя на STARD13 и подавляя miR-200 в TNBC (рис.) [13]. Эти результаты показывают, что нацеливание на PDGF / PDGFR в микроокружении опухоли может быть многообещающим терапевтическим подходом для лечения TNBC.

FGFR: аномально экспрессируется при раке молочной железы и имеет значение для таргетной терапии

Члены семейства FGFR (FGFR1, FGFR2, FGFR3 и FGFR4) состоят из внеклеточного лиганд-связывающего домена, трансмембранного домена и внутриклеточной тирозинкиназы (TK) домен. Внеклеточный домен имеет три Ig-подобных домена (IgI-III).Связывание FGFs с FGFR приводит к димеризации и последующей активации внутриклеточного киназного домена, что приводит к перекрестному фосфорилированию остатков тирозина, присутствующих на цитоплазматическом хвосте рецептора [82]. Пути Ras / MAPK и PI3K / Akt активируются ниже этих рецепторов при стимуляции лигандом. Эти пути, как известно, аномально активируются при раке груди и участвуют в выживании, пролиферации, апоптозе и миграции клеток [83, 84]. FGFRs несут генетические аберрации, такие как амплификации FGFR1, FGFR2 и FGFR4 и мутации в генах FGFR2 и FGFR4 при раке груди [84–87].Метастатическая лобулярная карцинома молочной железы, которая показывает плохой ответ на химиотерапию, демонстрирует амплификацию гена FGFR1 с последствиями для таргетной терапии [86]. Formisano et al. продемонстрировали, что при раке молочной железы ER + наблюдается амплификация FGFR1. Они обнаружили, что FGFR связывается с ERα в ядрах клеток рака груди и регулирует ER-зависимые гены в присутствии лишения эстрогена. Помимо ER + рака молочной железы, амплификация гена FGFR1 коррелировала с плохим прогнозом при HER2-раке молочной железы [88].Более того, повышение уровня FGFR регулирует ремоделирование стромы опухоли и рецидив опухоли при раке молочной железы, управляемом FGFR1 [2]. Следовательно, исследования с комбинированной терапией, нацеленной на FGFR1 и другие RTK, показали лучшие результаты в лечении рака по сравнению с нацеливанием на одну RTK. Однонуклеотидные полиморфизмы (SNP) в FGFR2 были связаны с повышенным риском ER + и PR + рака молочной железы [89]. Cerliani et al. наблюдали взаимодействие FGFR2 с прогестероном и STAT5 в опухоли груди, что привело к усилению транскрипции PR / STAT5-регулируемых генов [90].Наблюдалась ассоциация экспрессии FGFR2 и FGFR3 с прогрессированием рака молочной железы ER + [91]. Несмотря на то, что роль FGFR3 в прогрессировании рака молочной железы изучена недостаточно, известно, что сплайсинговые варианты FGFR3 локализуются в ядрах эпителиальных раковых клеток молочной железы [92]. Koziczak et al. показали, что FGFR4 и ErbB2 совместно регулируют экспрессию циклина D1, способствуя пролиферации клеток при раке груди [93]. Регулируемая передачей сигналов FGFR ERK1 / 2-опосредованная петля положительной обратной связи Twist1 стабилизирует лекарственно-устойчивый фенотип CD44 ^high после ингибирования ErbB (рис.) [94]. На основании вышеизложенных результатов ясно, что FGFR механистически связаны с функциями других RTK и лекарственной устойчивостью и могут быть потенциальными мишенями для лечения рака груди.

Роль miRNAs и lncRNAs в регуляции передачи сигналов RTK

В последние годы в нескольких исследованиях сообщается о роли микроРНК (miRNAs) и длинных некодирующих РНК (lncRNAs) в регуляции экспрессии компонентов различных путей передачи сигналов RTK. Tan et al. показали, что уровень ErbB2 в тамоксифен-резистентном раке молочной железы ER ⁺ жестко регулируется взаимодействием между miR-26a / b и человеческим антигеном R (HuR) (рис.) [95]. miR-34a и miR-155 также регулируют экспрессию ErbB2 на посттранскрипционном уровне (рис.) [96, 97]. miR-24 нацелен на два регулятора (тирозин-протеинфосфатаза нерецепторного типа 9 (PTPN9) и тирозин-протеинфосфатаза F (PTPRF) рецепторного типа) активации EGFR, тем самым способствуя метастазированию рака груди [98]. EGFR является прямой мишенью miR-206 при раке молочной железы, а последний индуцируется при раке молочной железы, дефицитном по ядерному фактору (эритроидный 2) -подобный 2 (NRF2) [99]. При раке молочной железы человека miR675, происходящая из h29 lncRNA, нацелена на c-Cbl и Cbl-b, E3 ubiquitin ligases, которые, как известно, разрушают EGFR и c-MET, тем самым повышая стабильность последних [100].lncRNA CYTOR регулирует прогрессирование рака груди посредством EGFR-зависимого пути [101]. Другая днРНК, BCAR4, усиливает активность рецепторов ErbB2 / 3 [102]. Роль различных miRNA и lnRNA в регуляции компонентов передачи сигналов RTK представлена ​​в таблице.

Таблица 1:

Роль miRNA и lncRNA в регуляции передачи сигналов RTK

Роль передачи сигналов RTK в устойчивости к лекарствам

Передача сигналов RTK при лекарственной устойчивости. a Обычные химиотерапевтические агенты снижают прогрессирование рака за счет ингибирования оси передачи сигналов MAPK / PI3K / Akt. Амплификация и сверхэкспрессия RTK, включая EGFR, HER2 и PDGFR, усиливают активацию оси PI3K / Akt / YB-1 / RTK для поддержания лекарственной устойчивости; увеличивает активность киназы и тем самым приводит к прогрессированию рака, оттоку лекарств и стволу рака. b Раковые клетки проявляют резистентность к RTK-терапии из-за нарушения взаимодействия между лекарственным средством и рецептором или активации альтернативной передачи сигналов RTK

Помимо эндокринной терапии, доступны и другие виды лечения, такие как хирургия, лучевая терапия и цитотоксические препараты. рак молочной железы. В основном антрациклины (агенты, повреждающие ДНК) и таксаны (агенты, стабилизирующие микротрубочки) широко используются при раке груди в качестве адъювантной или неоадъювантной терапии [118]. Однако устойчивость к цитотоксическим противораковым препаратам является основным недостатком лечения рака.Множественная лекарственная устойчивость в основном связана со стволовостью рака и оттоком лекарств, обусловленным различными сигналами выживания [119]. Важно отметить, что RTK являются ключевыми регуляторами стволовости рака и связаны с лекарственной устойчивостью клеток рака груди. В общем, различные RTK активируют передачу сигналов PI3K / Akt, чтобы индуцировать экспрессию факторов стволовости рака, белков, ассоциированных с множественной лекарственной устойчивостью, и мембранных переносчиков в раковых клетках. Накапливающиеся данные ясно указывают на то, что повышающая регуляция RTK, включая EGFR, HER2, VEGFR и IGF-1R, в ходе химиотерапии связана с избыточной экспрессией / активацией переносчиков оттока лекарств [41, 42].Jin et al. показали сильную положительную корреляцию между экспрессией р-гликопротеина и EGFR с общей выживаемостью и выживаемостью без заболевания [43]. Более того, более высокая экспрессия EGFR и HER2 обнаруживается в резистентных к доксорубицину клетках MCF7 по сравнению с чувствительными к доксорубицину клетками MCF7. Сверхэкспрессия HER2 также вызывает устойчивость к различным химиотерапевтическим агентам, таким как таксан, циклофосфамид, метотрексат, эпирубицин, при раке молочной железы [120]. Более того, циркулирующие опухолевые клетки (ЦКО), экспрессирующие HER2, проявляют меньшую чувствительность к различным химиотерапевтическим агентам, включая доксорубицин, доцетаксел и 5-фторурацил, по сравнению с HER-отрицательными ЦКО [121].Сверхэкспрессия RTK коррелирует с экспрессией факторов транскрипции, связанных с лекарственной устойчивостью при раке груди. YB-1 является регулятором транскрипции / трансляции и сверхэкспрессируется в раковых стволовых клетках. Сообщается о ядерной локализации YB-1 у пациентов с рецидивом рака и у пациентов с лекарственной устойчивостью независимо от статуса ER и HER2. Регулируемый RTK PI3K / Akt фосфорилирует YB-1 по Ser-102 для облегчения ядерной локализации. Кроме того, ядерный YB-1 связывается со специфической областью промотора и транскрипционно активирует экспрессию RTK, включая EGFR, HER2 и VEGFR.Нарушение в самоусиливающейся петле YB-1 / RTK значительно снижает стволовость рака и отток лекарств в клетки рака груди [122]. Более того, YB-1 транскрипционно увеличивает экспрессию р-гликопротеинов (MDR-1 и MDR-3), провоцирует множественную лекарственную устойчивость при раке груди (рис.) [123, 124]. Известно, что ТАМ влияют на поддержание подходящей микросреды для раковых стволовых клеток и устойчивую лекарственную устойчивость при раке груди. ТАМ продуцируют более высокий уровень цитокинов, TGFα, EGF, FGF и VEGF в микроокружении опухоли.Более высокие уровни этих лигандов активируют передачу сигналов RTK при раке груди, а также в макрофагах [125]. Сильная корреляция между экспрессией EGFR и макрофагами CD163 + была обнаружена у пациентов с устойчивым к тамоксифену раком молочной железы [126]. Более того, ТАМ активируют гены, связанные со стволовостью рака, вместе с повышенным оттоком лекарств и химиорезистентностью в доклинической модели рака молочной железы [127].

Терапевтические средства для лечения рака, нацеленные на рецепторную тирозинкиназу (RTK)

Рак молочной железы представляет собой гетерогенное заболевание, которое на молекулярном уровне охарактеризовано на пять подтипов в зависимости от экспрессии ER, PR и HER2.Эти подтипы включают просвет A (низкий уровень, ER + / PR +, HER2-, низкий Ki67), просвет B (ER + / PR +, HER2 + или HER2-, высокий Ki67), TNBC или базальный (ER- / PR- и HER2). -), HER2-обогащенный и нормальный рак молочной железы [128]. При раке молочной железы, положительном по рецепторам гормонов (просвет A и B), гормональная терапия состоит из селективных модуляторов рецепторов эстрогена (тамоксифен и ралоксифен), которые обычно используются в качестве адъювантной терапии [129]. Поскольку TNBC или базальный и HER-обогащенный рак молочной железы не экспрессируют гормональные рецепторы, гормональная терапия неэффективна для этих подтипов.Однако из-за выраженной экспрессии RTK в подтипах, обогащенных TNBC и HER2, блокирование функций RTK является одним из многообещающих подходов к лечению рака молочной железы, обогащенного TNBC и HER2. До сих пор были приняты различные стратегии для ингибирования RTK-зависимой передачи сигналов. Мутации или сверхэкспрессия генов EGFR приводят к прогрессированию опухоли и устойчивости к лекарствам при различных типах рака, включая рак груди [127]. Следовательно, EGFR потенциально может стать привлекательной лекарственной мишенью при раке молочной железы, а ингибиторы EGFR, включая низкомолекулярные ингибиторы и моноклональные антитела (mAb), были разработаны, и некоторые из них в настоящее время используются в клиниках.Сверхэкспрессия HER2 часто встречается при раке груди. Было разработано несколько лекарств, нацеленных на HER2, которые в настоящее время используются для лечения рака груди.

Трастузумаб (Герцептин) представляет собой гуманизированное mAb, нацеленное на внеклеточный домен HER2 при раке молочной железы HER2 +, и сообщалось, что оно увеличивает выживаемость пациентов на ранних и поздних стадиях рака молочной железы [130]. Однако точный механизм, благодаря которому трастузумаб проявляет свой терапевтический эффект, не совсем понятен.De et al. сообщили, что трастузумаб ингибирует гетеродимеризацию HER2-HER3, которая, как известно, происходит независимо от лигандов при раке молочной железы HER2 +. В нескольких отчетах также предполагалось, что трастузумаб может вызывать деградацию HER2, но лежащий в основе механизм не изучен [131]. Хотя лечение трастузумабом значительно улучшает исход заболевания, резистентность к трастузумабу является основным препятствием для лечения HER2-положительного рака молочной железы. Примерно 65% HER2-положительных пациентов с раком молочной железы не отвечают на первичное лечение трастузумабом.Более того, у большинства пациентов, которые изначально хорошо отвечали на терапию трастузумабом, позже наблюдается рецидив опухоли [132, 133]. В 2013 году FDA одобрило конъюгат антитело-лекарственное средство T-DM1 или трастузумаб эмтанзин или адотрастузумаб эмтанзин (торговое название Kadcyla) для лечения HER-положительных пациентов с метастатическим раком груди, которые ранее получали трастузумаб и таксан. T-DM1 состоит из трастузумаба и цитотоксического агента эмтанзина (DM1), который убивает раковые клетки, связываясь с тубулином [134].Случайное испытание на 991 пациенте с HER2-положительным распространенным раком молочной железы показало более высокую медианную выживаемость без прогрессирования у пациентов, получавших T-DM1, по сравнению с пациентами, получавшими лапатиниб плюс капецитабин [135]. Однако недавно завершенное исследование III фазы с использованием схем трастузумаба плюс таксан, T-DM1 плюс плацебо, T-DM1 или T-DM1 плюс пертузумаб в стандартных дозах у 1095 HER2-положительных пациентов с распространенным раком молочной железы. Не наблюдалось значительного увеличения выживаемости без прогрессирования в группах T-DM1 и T-DM1 плюс пертузумаб по сравнению с трастузумабом плюс таксаном; хотя руки, содержащие T-DM1, показали лучшую переносимость [136].Пертузумаб (торговое название perjeta) – еще одно моноклональное антитело против HER2, которое было одобрено для неоадъювантной или адъювантной терапии HER2-положительного распространенного рака молочной железы в комбинации с трастузумабом и доцетакселом. Клинические испытания показали, что пациенты с раком груди, которым вводили комбинацию пертузумаба, трастузумаба и доцетаксела, увеличивали выживаемость без прогрессирования заболевания по сравнению с контрольной группой [137, 138].

TNBC или базальный рак молочной железы, как известно, отрицателен для HER2, который экспрессирует EGFR у 40% пациентов, из которых 18% пациентов, как сообщается, имеют амплифицированный ген EGFR.Следовательно, EGFR является одной из важных мишеней для HER2-отрицательного рака молочной железы, включая TNBC. Лапатиниб (Tykerb), двойной ингибитор тирозинкиназы, связывается с АТФ-связывающим карманом киназного домена EGFR и HER2 и блокирует связывание АТФ, что приводит к ингибированию активности киназ EGFR и HER2. Известно, что ингибиторы тирозинкиназы (TKI) используются в качестве альтернативной схемы лечения у пациентов с HER2 + раком молочной железы с резистентностью к трастузумабу [139, 140]. Кроме того, лапатиниб использовался в сочетании с другими противоопухолевыми препаратами, капецитабином или летрозолом.Эти комбинированные методы лечения показали более высокую выживаемость без признаков заболевания у пациентов с метастатическим раком молочной железы HER2 + [141, 142]. Было проведено множество клинических испытаний для оценки эффективности и токсичности TKI как отдельно, так и в комбинации с другими лекарствами при раке молочной железы. К сожалению, пока результаты этих испытаний не оправдались. Некоторые испытания и их результаты перечислены в таблице. Клинические испытания фазы II гефитиниба или эрлотиниба показали низкую общую скорость ответа (ЧОО), тогда как клинические испытания гефитиниба в комбинации с эпирубицином и циклофосфамидом не показали значительной разницы в патологическом полном ответе при ER-отрицательном раке молочной железы [142–146].Кроме того, афатиниб, необратимый TKI EGFR второго поколения, не показал объективных результатов в исследовании фазы II у пациентов с метастатическим TNBC [147].

Таблица 2

Было проведено шесть клинических испытаний mAb против EGFR для изучения их эффективности и безопасности у пациентов с TNBC, как показано в таблице.Кэри и др. выполнили клинические испытания метастатического распространенного рецидивирующего рака молочной железы, чтобы изучить эффективность цетуксимаба или цетуксимаба в сочетании с карбоплатином. Цетуксимаб в сочетании с карбоплатином продемонстрировал более высокую скорость ответа по сравнению с одним карбоплатином. Однако у 13 из 18 пролеченных пациентов была обнаружена активная передача сигналов EGFR, что указывает на то, что цетуксимаб не может ингибировать путь EGFR [148]. Сообщалось о более высоком уровне ответа у пациентов, получавших цисплатин-цетуксимаб (20%), по сравнению с группой, получавшей цисплатин (10%), при распространенном TNBC.Однако результаты не были статистически значимыми [149]. Аналогичным образом, исследование фазы II применения иксабепилона отдельно и иксабепилона плюс цетуксимаб у пациентов с прогрессирующим / метастатическим TNBC было проведено Tredan et al. Это исследование не показало улучшения показателей ответа [150]. Между тем, иринотекан и цетуксимаб показали повышенную частоту ответа у пациентов с TNBC по сравнению с другими подтипами, однако результаты не были статистически значимыми [151]. Умеренный ответ наблюдался, когда операбельные пациенты с TNBC лечились стандартным FEC (5-фторурацил, эпидоксорубицин и циклофосфамид) после предоперационной химиотерапии, состоящей из панитумумаба или цетуксимаба в сочетании с доцетакселом [152, 153].Лимфоциты, инфильтрирующие опухоль (TIL) с более высоким содержанием CD8 +, были обнаружены в микроокружении опухоли в ответ на неоадъювантную терапию EGFR mAb. В целом, результаты клинических испытаний mAb к EGFR в TNBC, по-видимому, немного лучше, чем у TKI EGFR. Несколько испытаний с использованием терапии против RTK и их результаты перечислены в таблице [146, 154–174].

Проблемы нацеливания на RTK при раке груди: акцент на компенсаторных элементах

Направленные на RTK терапевтические препараты, как известно, снижают множественную лекарственную устойчивость и фенотип CSC в клетках рака груди.Однако раковые клетки демонстрируют устойчивость к ингибиторам RTK в клинических и доклинических моделях. Например, известно, что HER2-таргетная терапия (трастузумаб, пертузумаб, TDM1 и лапатиниб) препятствует прогрессированию первичной опухоли и рецидиву рака, но все же лекарственная устойчивость наблюдается примерно у 80% пациентов с HER2 + метастатическим раком груди [142]. Точно так же многие типы рака, включая рак груди, часто приобретают устойчивость к различным ингибиторам RTK, таким как ингибиторы VEGFR (бевацизумаб) [175], ингибиторы EGFR (гефитиниб) [176], ингибиторы FGFR (AZD4547) [177].Было выведено несколько механизмов для описания возникновения устойчивости к ингибиторам RTK. Несколько мутаций в RTK и их нижестоящих мишенях, а также активация множества других RTK являются основными компенсаторными элементами, инициирующими пути выживания и резистентность к терапии против RTK при раке молочной железы. IGF1R, EGFR, AXL, VEGFR являются другими членами RTK, которые имеют общие нижестоящие сигнальные молекулы, такие как PI3K / Akt / mTOR и MAPK с HER2 при раке груди [178]. Более того, IGF1R сверхэкспрессируется при раке молочной железы HER2 + и образует гетеромерный комплекс с HER2 и HER3 для активации сигнального пути PI3K.Образование этих гетеромерных комплексов с белками семейства HER было связано с устойчивостью к трастузумабу у пациентов с метастатическим раком молочной железы HER2 + [179]. Сообщалось, что комбинация препаратов против HER2 с mAb против IGF1R (метформин и фигитумумаб) оказывает синергетическое действие на клетки рака молочной железы. C-Met представляет собой RTK, часто экспрессируется у пациентов с раком молочной железы HER2 + и способствует устойчивости к трастузумабу. Повышающая регуляция c-Met защищает раковые клетки от трастузумаба посредством отмены индукции p27, тогда как ингибирование c-Met сенсибилизирует раковые клетки к лечению трастузумабом [180].c-Src-опосредованное фосфорилирование EGFR по Tyr845, Tyr992 и Tyr1086 связано с устойчивостью к терапии против EGFR при раке молочной железы. Активация c-Met во время лечения EGFR способствует фосфорилированию, связанному с c-Src-киназой, и росту клеток в клетках рака молочной железы. Кроме того, комбинация низкомолекулярных ингибиторов c-Met, нацеленных на нацеливание, вместе с ингибитором EGFR снижает фосфорилирование EGFR и активность киназы посредством ингибирования киназы c-Src, тем самым снижая устойчивость к EGFR [181]. Сообщалось об увеличении числа копий FGF3 / 4/19 в опухолях, резистентных к лапатинибу и трастузамабу.Более высокая экспрессия и фосфорилирование FGFR коррелируют с уменьшением безрецидивной выживаемости и устойчивости к терапии анти-HER2 у пациентов с раком груди. Активация FGFR дополнительно стимулирует фосфорилирование нерецепторных киназ, таких как MAPK и PI3K / Akt, через активацию фосфолипазы Cγ при тамоксифен-резистентном раке молочной железы [182]. Амплификации и мутации в зависимых от RTK нижестоящих генах-мишенях (PI3KCA или Akt) обходят роль RTK в их активации, что приводит к непрерывной активации передачи сигналов роста в клетках рака молочной железы.Мутация в PI3CA сильно связана с гиперэкспрессией ErbB2 и метастазированием в лимфатические узлы [183].

Бевацизумаб – это первое лекарство против VEGFR, одобренное FDA США для лечения рака груди, но в конечном итоге его прекращают из-за появления резистентности к нему. Анти-VEGFR-терапия вызывает гипоксию в микросреде опухоли, что приводит к увеличению агрессивности рака груди. Под действием гипоксических стимулов стромальные клетки секретируют очень высокий уровень цитокинов, которые активируют альтернативные ангиогенные пути и увеличивают стволовость рака и аутофагию [175].Эфрин-A1 и B2 являются проангиогенными факторами, важными для ремоделирования и созревания новых кровеносных сосудов. Гипоксия опосредует активацию эфрина, а экспрессия эфринов тесно связана с резистентностью к терапии VEGFR. Несколько проангиогенных факторов, таких как ангиопоэтин 2 (ANG-2), EGF, bFGF, фактор роста кератиноцитов, IGF-1, TGF-β, TNF-α и интерлейкины (IL-1, IL-8, IL-12 и IL-17 ) были вовлечены в связанную с гипоксией резистентность опухоли к терапии анти-VEGFR [184].Секреция IL-17, G-CSF, IL-6 и SDF1 в микроокружении опухоли рекрутирует миелоидные клетки CD11b + Gr1 + в опухоль, и обеспечение Bv8-ассоциированного VEGFR-независимого ангиогенеза приводит к устойчивости к терапии анти-VEGFR. Истощение инфильтрации миелоидных клеток CD11b + Gr1 + нейтрализующими антителами Bv8 повышает чувствительность раковых клеток к терапии, направленной на VEGFR [185].

Нарушение взаимодействия между агентами против RTK и их рецептором – еще одна причина развития резистентности. Это может быть связано с более высоким присутствием маскирующих белков в непосредственной близости от рецепторов, структурными изменениями рецептора и отсутствием экспрессии целевого домена.Муцин-4 и CD44 являются белками клеточной поверхности, сверхэкспрессируемыми у пациентов с устойчивым к трастузумабу раком молочной железы. Экспрессия этих белков в непосредственной близости от эпитопа HER2 маскирует взаимодействие между трастузумабом и HER2 и увеличивает рост рака груди [186, 187]. С другой стороны, экспрессия усеченной версии HER2 перекрывает чувствительность к трастузумабу при раке груди. p95 ^HER2 образует гетеродимер с белком HER3 и активирует нижестоящую передачу сигналов лиганд-независимым образом (рис.) [188]. Елияткин и др. . показали, что 28% пациентов, у которых развивается резистентность к трастузумабу, имеют более высокую экспрессию p95 ^HER2 . Однако низкий уровень экспрессии p95 ^HER2 обнаруживается и у пациентов, чувствительных к трастузумабу [189]. Более того, мутации в HER2 могут нарушать распознавание антител или физическое взаимодействие между лекарством и рецептором. Мутация T798M в HER2 показала повышенную автокаталитическую активность, а экспрессия лигандов EGFR приводит к 10-кратным изменениям IC50 лапатиниба в клетках рака молочной железы человека.Более того, нацеленное на EGFR антитело, цетуксимаб или лапатиниб восстанавливает устойчивость к трастузумабу в этих специфичных для T798M клетках [190]. Hanker et al. показали, что пациенты с мутацией HER2 ^L869R приобретают вторичную мутацию в HER2 ^T798I как последующий ответ на лечение нератинибом. Исследования молекулярного моделирования показали, что HER2 ^T798I имеет повышенное содержание изолейцина в своей структуре белка, что снижает связывание между нератинибом и HER2 [191].

СЕК.gov | Превышен порог скорости запросов

Чтобы обеспечить равный доступ для всех пользователей, SEC оставляет за собой право ограничивать запросы, исходящие от необъявленных автоматизированных инструментов. Ваш запрос был идентифицирован как часть сети автоматизированных инструментов за пределами допустимой политики и будет обрабатываться до тех пор, пока не будут приняты меры по объявлению вашего трафика.

Укажите свой трафик, обновив свой пользовательский агент, включив в него информацию о компании.

Для лучших практик по эффективной загрузке информации из SEC.gov, включая последние документы EDGAR, посетите sec.gov/developer. Вы также можете подписаться на рассылку обновлений по электронной почте о программе открытых данных SEC, включая передовые методы, которые делают загрузку данных более эффективной, и улучшения SEC.gov, которые могут повлиять на процессы загрузки по сценарию. Для получения дополнительной информации обращайтесь по адресу [email protected].

Для получения дополнительной информации см. Политику конфиденциальности и безопасности веб-сайта SEC. Благодарим вас за интерес к Комиссии по ценным бумагам и биржам США.

Идентификатор ссылки: 0.67fd733e.1632522316.6566e666

Дополнительная информация

Политика безопасности в Интернете

Используя этот сайт, вы соглашаетесь на мониторинг и аудит безопасности. В целях безопасности и обеспечения того, чтобы общедоступная услуга оставалась доступной для пользователей, эта правительственная компьютерная система использует программы для мониторинга сетевого трафика для выявления несанкционированных попыток загрузки или изменения информации или иного причинения ущерба, включая попытки отказать пользователям в обслуживании.

Несанкционированные попытки загрузить информацию и / или изменить информацию в любой части этого сайта строго запрещены и подлежат судебному преследованию в соответствии с Законом о компьютерном мошенничестве и злоупотреблениях 1986 года и Законом о защите национальной информационной инфраструктуры 1996 года (см. Раздел 18 U.S.C. §§ 1001 и 1030).

Чтобы обеспечить хорошую работу нашего веб-сайта для всех пользователей, SEC отслеживает частоту запросов на контент SEC.gov, чтобы гарантировать, что автоматический поиск не влияет на возможность доступа других лиц к контенту SEC.gov. Мы оставляем за собой право блокировать IP-адреса, которые отправляют чрезмерное количество запросов. Текущие правила ограничивают пользователей до 10 запросов в секунду, независимо от количества машин, используемых для отправки запросов.

Если пользователь или приложение отправляет более 10 запросов в секунду, дальнейшие запросы с IP-адреса (-ов) могут быть ограничены на короткий период.Как только количество запросов упадет ниже порогового значения на 10 минут, пользователь может возобновить доступ к контенту на SEC.gov. Эта практика SEC предназначена для ограничения чрезмерного автоматического поиска на SEC.gov и не предназначена и не ожидается, чтобы повлиять на людей, просматривающих веб-сайт SEC.gov.

Обратите внимание, что эта политика может измениться, поскольку SEC управляет SEC.gov, чтобы гарантировать, что веб-сайт работает эффективно и остается доступным для всех пользователей.

Примечание: Мы не предлагаем техническую поддержку для разработки или отладки процессов загрузки по сценарию.

Fort Worth Daily Gazette. (Форт-Уэрт, Техас), Vol. 11, No. 24, Ed. 1, суббота, 8 августа 1885 г. – Страница 6 из 8

Эти элементы управления являются экспериментальными и еще не оптимизированы для удобства пользователей.

Следующий текст был автоматически извлечен из изображения на этой странице с помощью программного обеспечения для оптического распознавания символов:

                                 
 A t 
 o 
 ex1ra <
 НАИБОЛЕЕ СОВЕРШЕННО СДЕЛАНО 
 e ttonfieit N tnr l Frnlt FUrom 
 Tinllla I mon Orntute Ahnnnil Koie etc I ton 
 flvDriwOoll atcljrmi0nitDrallyiwtho 
 GOTC 
 GOTC 
 GOTC 
 GOTC 
 GOTC 
 GOTC 
 GOTC 
 GOTC 
 GOTC 
 GOTC 
 GOTC Iralua lltiuiMii 
 DFO 2rt Wortla 
 Clijlmriio Sitittttm МРЭК 
 unittnii Cniiiernn 
 BS Keiko Onlim ihlOI 
 HKSWkWii привет VVIehllii УУ 
 Беспроводной KvAvoWHIilla Piillv 
 Sffl Arrlo п п orili 
 МИН fKIlosi 
 или 
 IMR lomiil 
 fitinrNin 
 iiti itiitmi 
 TLCO OT tnotUolni Ами uhemlHiij 
 Vllliino nliliull 
 hiiuorrvll Ilrciiluiiii Ilelltllle 
 HiwmiiiiTir lliiiiouiii 
 NML inlvialoii 
 TsTEWLUUTKTO 
 Mallory пароходстве 
 и из Европы на самые низкие цены 
 HlUOlAli ADVAXTAUKN 
 jiovKJiiiNror naiNs 
 IOltrUOIint lOUVMIlSKlV M> IIOIHIIIN 
 CAV Порт Wurtli 8 трактире в 
 Arrho lloimton 10 It p in 
 Arrhtlliihi lnii It ix iii в 
 J  linvo llelintunolno Jl As is tiliiiiiu 
 AtrlMilorl Worth W Win в 
 для того, чтобы лифурийититлдии nililrii n- 
 ot iti Miniiii ciii tilini in <
 1iirl Wutlli 
 jS l5iiiii Oili  IViMhk 1iieii May ID 1HV 
 Wii r 
 B i No cm  
 mf mi wi iiiiiij 
 Нет ki7 oiiiij e 
 lilNI 
 Nonot daily ii 
> i ilnUj 
 No 111 тусклый 
 TIHMlVUIIli 
 AtrUi 
 RW> V 8i80via 
 JfJgL lroiiin 
 iitsiili 
 iUfMH 111 
 yoitin 
 No IU lull 
 Nulftnll8xl 9068 9068 Nulftnll8 9068 9068 Nulftnll8 9068 
 jNoiauociUiiiuiilfliliii 
 i 13 it in 
 eKCiiH Mm 7 Ulli 
 JWIIIC 
 in 
 rrlre 
 n M p hi 
 HM ji ill 
 yuur wolii it v oisi iifci i 
 Il 
 MViii IIUI 
 Il 
 Mviii IIi Sj Hoihu Wmi 
 B NiOitiiiiiv jy mi ii in 
 BS i V iV iliiltlmMumiuiliiItiMHOO 1> m 
 lAfa mMsoii iiivisN 
 8lilp 111 
 MillUIIIII 
 7 ml II 111 
 I Ul p in 
 
 KTOivliit RiM 
 7iWfrtin 
 Knave 
 7 W it m 
 An he 
 1 15 pm 
 rrl> 
 K Hlllijlil 
 iX> это в 
 ivr> i4 oi nmt mn lilwcmi m Uhii nml 
 lilwcmi m Uhii nml 
 lilwcmi m Uhii nml 
 lilwcmi m Uhii nml 
 lilwcmi m Uhii nml 
 1iof 
 11 
 Nii tui mul tta lictrteen ldrt nrlli nml Sen 
 OrtennK> 
 So iQH nml M7 lulwemi Tint nii mul 
 Colnrmlti 
 N  tinoii lt from im Auto iMnmllil run On llln I 
 Not v mul I Ketneou I ml World Ilim tun 
 mul SitUfMlon 111iisi 
 y Ililm Ylcltut fint I 
 iuooiioi mil 
 tn mul nflr Koiittinlicr 21 1 1 1 piiMviiiKerl 90 7688 7688 7688 768 868 8688 I 
> 
 I ID p in 
 illRU> in 
 Siic> rilit niliilK 
 I> lh> lllltln lill filter Mini me lee 
 ttleiiiimlliii nl KhhI IiIikiotiiI 
 A Hy Urn linn ol HukIich llros mnuufne 
 J 1 utlttHE cluiulmts ol ImlliiM Texture This en 
 live tar of Ink 
> ItiJ Powders nlluH Elder vlueunv ele 
 Jlr KV lliifjlioni, который прослил ocr 
 f , освещенный nlid 
 vyoAtii hctiu mijtuymijtujtwy 
, mijtulit 908, mijtulli, 
, mijtirax, 
, mijtulit 
, mijtulli, 
 вышеупомянутый HNO нашел это 
 tiCCOWtrv к comlmt eeesslu fciuieiitu 
 Houy MUotUer ilnotts ncctous или uleo 
 iolliililcUImVo над Mood в Wu> 
 из HUocuHnSully liiaiiurncturliiK ж 
 vlncjnr II нашего 
 Snitlliofu ullliUMu oxpcrhneiiK 
 jiUo rVMiUi1 INcoxei 
> Всея iijjcut I> Uh полностью старый 
 ttlili Ulllciilty ThN iiKimt W tlio cMiiict 
 ortlwhuik otn treo IihIIkciious t o 
 Hiitu немногих OurryiuK их exteil 
 STATU NJ1MS Imliu его возлюбленная lcitvc lier home in> t it mother nml live children lulna 
 wlillc she vvui Iiiihv with tlii ocriipuilon, вероятно, в бедных обстоятельствах за 
  По прибытии на адрес 
  с liltn lint lie wns luit by mi iitiKrv, lioui e found llie fnots not overstntfds> 
> iiiiiiiinnui mid liorIm  vvvyahk mi 
 iMTlllllolllPtllKlltlV 
 WWUIVCIIIH Tl H 
 j count набирает еще один vhtory 
 niiis 
 для Itxiiil 
 option 
 1 In tlicJitomittl1ctool нарушен K It 
 Hrhrjfs nml v A Kills затем признал себя виновным 
 Я виновен В двух ромах ruch mid I Jlnum 
 tardier В нашем nml скомпрометирован liy 
 jmyJmr Si In ouch case mul njtroelnjt not 
 tOHCllany mom hour aLall In eno 
 Mliij do Hie county is prosionie I he 
 rcmitliillig case from IlKiurljtlliiil lilhc 
 teen fouiidJiy County Altgriwy Temple 
 orvrtvllio rc hale 
 eotlon nut, принесенный In yosterdii hy 
 I Jiomns tould color Он весил <0t 
 фунтов TiOX AMI и niim iurehitcd Jiy IV 
 Chllixkl at III Ots 
 The Wealher Is Очень сухой средне-теплый средний-
 i хлопок Is xhedicipetia 
 Люди готовы к более 
 годам в середине 
 года. Он был направлен на то, чтобы я пошутил и доставил 
 печени в город на заводе в течение 10 месяцев. iiiki> viv 
 Xmawta ami Montt  MfKlNMA Tii Ail II Oil 
 mn6uoii TKMCKTS 
 И HflKijngii OfusMit l nil IViliiU llilitlinl> 868 llulliirsiii i 
 Tfio jfiiirmier Uiiulo it e 
 mul 
 lurk In iuIxohIoii 
 idle 
 niimherof наших людей сегодня 
 ehuiiiplon leiistlaw человек этой шеи 
 лес 
 петиция htiii llleiluiid мы будем 
 imc mi ilcctlon на localoption quute 
 Hon В этом подсчете Ilotli hlilen aie a 
 прочитал lilalmlui Hie lclorj ii из Jhoiuns TT MetIeace, который несколько 
 To lntllen Wlihliur I Urlnit ITKnil to UiIh i laH ulnce был присужден mi hilbltuill 
 imtrj diuiiknnl Mr, в то время как onen взял jiiik 
 в сеансе Hie llneplatilui 908 milneplatilui 
 miller 
 j I  Я выщелачивал наш город fioiu другое polnlN u 
 lleelllifton the llrelileun toiiririinclit до 
 Я лежал в руках героя из t 17-е соединение с Lfid liiMmit 
 Если это схема imiuejiiinkttiu 
 liibelmlf eiiterpilHe mid out ell 
 eilH, мы дадим подсказку, что это n teneroiiK 
, предлагающее членам Mate ami Mich 
 lxlloi Наш cli pioposeffto lyiiinn 
 In pi 1es nml to donnle Ihe Fund for Hint 
 pin pom ami iloiw milnsk Посетители или лир 
 человек, чтобы eoiitrlblile aeent к Ihe en 
 li rpilse 
 The tilylirUlmlelphlims me Holdlnle 
 присутствовало и достаточно InleniHtllis 
 liAUIi I IHs 
 CirriwHiiiili> nritottlivilikrettv 
 lhiiul V Ti Vui Понедельник 
 iiioiiiIiikii shitp licider imiiied Maii 
 lodnywas был найден мертвым в 
 году в 
 году был найден мертвым в 
 году. задушить Мовлчин изобразил Илойотто, который 
 привязал нас к своему помощнику 
 Шилф Кехнвии Лайнлун из своего 
 уэйрииб oillH tolloweil Ids tinll lillo 
 Mexico и Iheiniirtleter был tiiiestnl nt 
 Moialu small MiaIciiii town The Me 
 cim tiulhoi Itley jiiw o the ilepuij Mirrlff nil 
 помощь, которую они могли бы сделать с 
 на острове 
 mode ol pioccdurc In 
 enhOH этого lintiiie The ptlsoncr whs 
 biiiiittlil to 1ledris eKt llH ami размещен в 
 Jnll awnlllmt eMindliloii документы 
 IUAWTOItli 
 tuiiirdiinitiuiii 
 toTuloVurioM of into hue lliiclmnnu 
 oamu here olnlinlii to he slrlfl of 
 Hunt ciuiuly when In lenlil ho lmd no 
 lepilaiilhorll tottriiNl Tsttej nmlehnrnes 
 melfeuvdim 
 melfeuvdim 
 melfeuvdimp связаны как iiosliiuMcr 
 здесь сегодня linlii> t lecelMd the assign 
 ment nIiicc Jlulnney K облигация была пересмотрена. 
 была использована thopostninsterjtenerul nt Wnsh. 
 III. iiIm Mr 1 ItJcpMeeded Ihiomjli the Iniliienee ol Lion It 
 Wntrlrk n rrtluiiio of clumilsiry In tlmiQ Mill 
 lTiIvoh lty ot llillndclplila Эти 
 wnii vits incii 
 lirrntifi> iiiiliii> iii Мистер 1 H tarr из Coiuniiohe 
 necldcuHy застрелил себя tiilllelliijiMneisil 
 ран с обычным blrdshol 
 niunle ot kuu находился в пределах двух кроватей от 
 его hiiul w lien llseboyleirged ami ничего 
 hutlor, в то время как nnortunnlc 
 omti minis life su, в то время как один выстрел 
 RlKht В центре его передней части 
 врезается все еще fuVthur tlu lme ascitnliicd bo Кроме того, с Mwcrnl raiiKlnt 
, который разжижает экстракт тууно, поскольку он полностью соответствует S, а не fnlnllj раненым 
 tvols Только урна ivmiiliilnjj fermruintlon 
 httowit к ntttt ami hMchcos m 
 Jllood fermentation vlMifei является причиной 908 luuo oombliicd с e 
 Uitcts of glnKerand лимонный reui 
 ilmillK tt u mo  0 ntliiuimv c> 
 ilose round 
 lljilitfutjiiiipiilatalobeera 
 ljilitfutjiiiipiilatalilobeera только с хорошим эффектом UK iieorilioliiictif 
, но не может быть отключен, но не может быть пропущен из двух исходных текстов Lemon mid Oliil 
. iou bo fouint at nil llrstclns druu и 
 KnHery ttit 
 Этот непосредственный раздел U Mtfferlim для 
 ratn, но множество руин закрылись в 
 Новый город tioldthwullo был уволен в 
 году, niiklni n очень ptetty hlto из 
 uboni двести ncres loa будет 
 помещено в snle hoou pwlKibl о высшем 
 mull tyre 
 ocourrcd Institut nliteelit в резиденции Mr Doiit68 мальчик 
 diHipplii n Ulobe Imitein на полу 
 Tho ilimes носил extlujtulslied wlili little 
 l little Iniutiito 
 ThonMvis a Ih tmte chince for a io 
 uilkhiimleimuni i lunntlc elopement 
 mxl 
 m. MJI 1 iv nt в MmtlMMiuas mKcl с 
 V w iiK ivv Hill sixinlsh, возможно, неплохой jlaimhter 
 IJ ui ti rU ox i того же rtuv, но он был испорчен 
. Самая нелепая ложь 
 семей NMLPHVNU. т фа то, что только любители luklnu pow имели tKud на Suuday nl hl, когда 
 r der to hii Inl kunMl In plneo of jwln к церкви до 
 heur nmsH должны были rvjwlr с ее har 
 Mto inu iihiiik j к дому tuflclmwt > 
 As t1W i aidALif 
 L vi 
 essik 
 Oisvxu 
 ax 
 TIIK UZKTTK FORT WOLLTII TKXAS sVTl UDA V UGlKT 8 
 cii tii> d через новые двухтактные пистолеты, изготовленные из семейства стандартных пистолетов с двигателем 
. doilslm from re left В клочьях и хотят, чтобы 
 шериф жаловался на нападение без каких-либо усилий, кроме того, что все обвинения в убийстве и убийстве были поданы на 
 человек и были незамедлительно внесены на счет денег, которые не подлежат 
, чтобы облегчить их погоду. leeu exeosslvol hoi я правильно лечу от них В будущем 
 luit our ulnht are cool and liul oritliiK Наша железная дорога aucnt old thlrtvflve 
 Мы wnnlliiK ralu Еда, многие - билеты в Koft Worth estetlH и 
 готовятся. orthelr второй урожай Hfiy the day pr  сравнительно безлюдным 
 triiiM i 
 firrwioniiuei> f llielinclii1 
 AliMst Tivs August 
 I MIIVMOII 
 I Ihe t> CorrMpoiiijenouflcheil de lantte uml 
 irrctpiiiiiloiHi 
 llrsK Ti 
 lttisu 
 if U> il < Alljf ilio 
 Kujuc nml, но и персонажи The 
 Social tllnss взяли на себя роль для двух 
 bonis nml llllcens, которые включают 908 встроенных приложений Были ir A inutlnee будет 
 Iveu Sittiinhi nt Vtild p in 
 hevenil ol the tinniKeis left IimIiv 
 kvii 
 iir> iiiiibiiSMif ilinti in tie 
 Kmi Tin All A line bed of 
 Kruy8ulnihle tinni iittenlun well venter 
 dii id n deplh of liB bet 
 the earold meeeolt Receiitlv jmr 
 ehiHeil b Messjs Cnmpbell X Co 
 of ll illns fiuiu Mi Deslla lliinton of 
 this place wns shlpiisl to the ownmsto 
 diy Ihe colt Uu miijnltlcenl eienluie 
 половина Slser к знаменитой rueehore 
 fii 1 vle 
 euiolf to i 
 теперь не может коснуться этого 01 pirly oc- 
 curred ut lie lesldenee г-на il W 
 llubbnid lust nluhi nl, который является cllle of 
 Kvle weiefu full iitlemlniiee UlTalr 
 был kIvcu В честь мисс Лулле Муич 
, маленькой дочери 
 lud ein Пропустил Минни Коллинз в интервью 
, включив в него несколько захватывающих сольных дуэтов NML SiTtiil к роману 
 квартетов к нему. uyxls tMy ir lllln 
 hnc предоставил кредит пиофесслуилу W 0 Amhiixni, в тот день ему было 
 г. ork on the roundhouent WaL f fuilo I 
 t clo up III late IhN ncifa 
 mil Springs nml us скоро n Ihilshcd 
 начнёт строительство первого в Albnii Prepar- 
 atory to tnnnlm llnou h pa  frclulit ruins Есть fnsl bcenmlni a 
 furmliiKcounly Там его luen около 
 stv selfblndm nnd косилочных машин 
 sohl heie Ibis season to ny noildn 
 uboni plows puiwil7irs uml iitlief un 
 выигранных судов 
 округа в середине 8-го округа JHI Smith ухо пришло в этот mcnlm 
 mukliiK phiil hcarls of the nillioidi 
 hos 
 iomiviiv j 
 C rre Hiinli nre f Die linnlle 
 loMlvtlwTi All I Ktul Ili1 
 inornluK the eiiiii line или cast 
 Io tuilk u trestle this side of iladewatei I 
 nciir Ollrues switch hud lurtl ilh 
 iipuiHllon iissoclallon, который будет призван, чтобы приказать павшим thioujdi Пришел unjilno om i 
 eslerdn nl a oclock Some biislness Jail ilfjlit, but a hiltdocncars weio badly 
 был заключен в последний раз, когда наш достойный человек был прохожим на перекрестке 
> 1 в последний день, когда это было kipt 
 loiciniy pavsen cr some time 
 добро пожаловать nihil ess Todaj бизнес rela громче 
 live to the ussocliitlon wus Itnllsuuled 
 Areport cniiie up jesteidny evenliu of i ii Hittroitn 
 Dr Iv Ilemlllcks death llxllij wus itnllsuuled ii The 
 id siK Iom  nr T Rum 
 orre uiilimu публичного enteitnlliuielil lhooerclsoseon 
 iiclli 
 ItirsK Tr Am <весь корпус sMed почетных цитат и Lyimiis 
 из Ihedelejnlojnlesoftlie 
 vllted the penlleiillnry ves N rw tivvr 
 tenlny nt J p in In Wilsons buajIcs nleh cuine out wns high enlertaliied 
 и т. д. Ирокссонский остроумие, согнутое школой, показало, что у него есть две или более серебряных подставки для находок стоимостью 2 
 тысяч часов. и учитель в мире переписал 
 человек, когда-либо встречавшийся в Husk Is In, оловянная непристойная шкатулка стоимостью 810 миллионов долларов США 
 рабочих умений Илнеллира Уоррена из 1orl Стоит музыка в 
 году. rccelvid a silver eatd Receiver 
 hall ju t coiupleled nml llttid up foi value8 Atone был вставлен в корзину 
 опей. Мало того, что было выставлено 1 фунт фольги Worth who 
 bv Его mimbeis lmJujr liitfc house nnd li icmlcied ценные услуги как Mi 908 68 Kieul success Tbo members of the pluv i Wunens tlrsl as innf butiis the book 
 deseive eiedlt foi Ihelr splendid acthifj не может быть hud lust night it will besent ciirinln rose nnd uu address tyi разместили четверых из них weto Hist kikIi 
 V II iiilnn был ilellvoieds hen u din и четыре секунды miule Школа была на 
 человек, нуждавшихся в тех, кто посетил разные 
 другие институты. лучший и самый тщательный ум 
 Ученики 
 все успехи в системе образования 
 ученики заметили деслик, который, по мнению ученых, 
, не имеют школьной школы 
 и все инициативы, оставленные учителями, оставленные учителями 
 to 
 day 
 1 A VIlit 
 Hitclnl l Hi nxitU 
 TWIOII Tt Все 7 Из-за 
 jircitlesl coiiilnKratlons Подсказка, мы скрыли 
 в течение некоторого времени ocoiiired на Wcdn csdav 
 niornliif В 1 час. 00 мин. это в n томе 
 ol smoke wns замечено IsHiiliucfioin W Jl 
 Tliorpes fiiiniture sloie uml iinniedl 
 itelvthc alnrni был озвучен The lire 
 nnd Is piolnbl hie llnest 
 nnd Is piolnbl hie llnest men Шины были на гуде 
 picMiit owueis pub I3U0 для ее мультика 
, чтобы помочь pillnnt 
 bovs В красном Tlie stoicbiilldlm belli 
 от fiiune the bus spieud rnpliUv espeel 
 все после того, как двери были сломаны в 
 Spniks ivcre Hjiy direction 
 UET hulltllnc wns the eaipenterl 
 shop ot W Williams, но ltiekllv 
 ciirpuiteis tools были сохранены 
 Элемент tleiy продолжал перемещаться 
 v Mtrsr5rwirk и 7T f Twyr 
 JOSEPH H 908 VBWLSi 
 Jll 
 ПРОИЗВОДИТЕЛЬ ПРАЗДНИЧНЫХ 
 LOAF 
 IfNAliE WEBER BOOKS КАНЦЕЛЯРСКИЕ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ 
 IVERS POND 
 Halo zxxxcZ Aiion 
 PIANOS 
 Заводские цены Дублированные 
 сделок в SecondHanfl Instruments 
 WALL Pj1> KI 
 Отправить образцы весенних стилей 
 Художественные материалы 
 БАЗОВЫЕ ШАРОВЫЕ ИЗДЕЛИЯ 
 ВВ и тин Mas the next to go 
 iii 
 Viiuiiilierot Kjldtes uie nuklui urmnes Однако до 
 Xno nllll I 1> I UiK tin liutlitlnn ull Ihe stock gles> t Mnili s MIU o 
 th rv 1bVZp o ir ijr xisfc isrfet 
 su VK K> 1 s W WIlllms Bulldl 400o в 
 cnpttanin только что будет 1> Kll> The fomploii S AriuslroilL biilldlm 
 Mlppers Ihe ii 
 briK club of Ihe 
 county n SSOOOi liistirnnce uo 
 inatelipiuetomoirovv w It Thurpe stock 
 1 он попадает в бесплатную поставку без возврата товаров в размере 
 долларов США. bullilln 
 iK Shurpc 91JOO liisiiniuce ijlOOO 
 nrtK Ut UM °>  Ожидается 
 bid i wllh 1 
 n 7 case ol lend 
 polsonlm nt live todav 
 iwlni TL 1> UUkl fres1> IS ts for cotlou thromlioiU 
 piiiitid room 
 страна wciv ucver лучше и мы 
 tol 
 Austin 
 мебели j 
 1 занято 
 Io 
 S C Klmll Imw at le i threequatuis ot n 
 SIMAMU  0s l Walter bah к 
 ncie, если на 
 будет погода 
 Ipps и другие luoiuuesof hd 
> imr cleik luvor us vvltlu 1 11 eov 
 Wvia 
 частично в цене за один бат на площади 
 округа, округ Колумбия выглядит хорошо при среднем значении в 
 долларов за каждый квадратный метр на один акр. из tinl 
 вниз Ti Mil iHinfnl acel 
 vestonNows wenheie на этой неделе tikliiLi 
 dentoeeuired В нашем lowiiu Он в ilsh из старого Au TLS 
, так как Mi nml Mis Oliver был nt Trouni Tho party look Его отъезд 
 leniptlicke to Она и 1i1r я r <> yi> были готовы покинуть 
 Оливер был на противоположной стороне 
> s T rsrSS 
 rtt 
 дома от ее мужа lu a наклоняющийся f enturpTstuj llttVe ci tv 
 позиция lookltij для Ihe fowl Ihe last Туман в церкви 
 llspllst 
 Aluiiymouru 
 suelnsr Это, но не его жена llnvw n lnnie llml t0 ll lm M> laH u hl 
 породил ладью, которая ударила ее оглушающим ударом 
 удар по стене Selllni здесь на twcnl 
 сбивает ее бессмысленный nnd mmctlii i> u> lnl на справедливом рынке 
 cental 
 pish of an iiieh or moic loii nnd hnlf 
 nn 
 дюймов шириной Миссис Оливер была Ollde limKIns rniti Mli nnd hnlf 
 В результате этого лучший способ лечения только 
 тяжелый шок, но его пациент не знает, что такое соляная ревматическая лихорадка 
 Доктор W II. lullv nnovirtd r> i> l все кожные высыпания и после 
 Через несколько дней Jlvd uurus piles orn jwy requlrud It 
 Vesterdny днем ​​n пара или vonnirl l Kiwtwte tlve peifeet sallsfaetlon 
 men troin Newport orn sportluk мои возвращенные lrlcc 3S центов за 
 ум, по крайней мере, их умы перевернули намек на продажу HW Williams tc 
 wuy istcnltV niniiscdl самостоятельно на 
 час или около того, живя в течение 
 часов или около того, живя в течение нескольких часов или около того, чтобы стрелять в одну и ту же дорогу. omniiuN i 
 часто это metillk aecompnntmeiit Inmle lly Morri clptr store one door not Hi piek 
 callcit a eutter несколько раз uiwwisWlok hold nml ut lohn Morris elcnn 
 депо быков ruiialujj uucomfortnti около 908 Власти clt i  не совсем соответствуют лимитам Wnst vim 
 FORT WORTH TEX 
 iiiid или Houston JSir  E 
 I otI Wovili Toxav 
 ПОЗВОНИТЕ И ПОСМОТРИТЕ НА 
 MASON HAMU 
 Toe Oiven Away fc> y 
 lX LM VU ll 1 A 
 1PH fl 
 <> TC> s 
 Slioot IMCusic 
 отправьте центы за 1MltIS 0 Sltxj 
 coiilibilijt отверстие 1K 
 clruineiiliil miule 
 Will imiUll toj w 
 ilBOTTO C r IsiIOEiS 
 OTV 
 и портативные молотилки 
 Colli Gins ai Ptem Flour Cora ni Feerl Mills aai M Hs 
 Mill Miieliiory telting 908 Шкивы с валками PRAYPAY 908 HAL 868 PAYPAY 908 ШКИВЫ ДЛЯ РЕМНЯ ПЕРЕНОСА 908 
 i 
 Gtxxxo IVEills etxxc 22vapoiators 1 
 u iWt unrttttne our m wrlte mi m 
 i 
 КОМПАНИЯ HUFFMAN IMPLEMENT 3S i 
 не может председательствовать на этих церемониях I 
 Silver liwl 1 U llrowu tiunran it 
 Благодаря нашему clllinw сердцу hs nru putltv Mi gtfa aud UlWeue 
 Oovnox 
 Queciisware Cr oelcory и 
 sSaoonrt um JIotis <0i 
 Посуда 
 txeets lcol Worlh 1> 

                                 

Новые страницы

Вот что дальше.

Показать все страницы в этом выпуске.

Искать внутри

Эту проблему можно поискать. Примечание. Результаты могут отличаться в зависимости от разборчивости текста в документе.

Инструменты / Загрузки

Получите копию этой страницы или просмотрите извлеченный текст.

Ссылка на текущую страницу этой газеты.

Fort Worth Daily Gazette. (Форт-Уэрт, Техас), Vol. 11, No. 24, Ed. 1, суббота, 8 августа 1885 г., газета, 8 августа 1885 г .; Форт-Уэрт, Техас. (https://texashistory.unt.edu/ark:/67531/metapth86555/m1/6/: по состоянию на 24 сентября 2021 г.), Библиотеки Университета Северного Техаса, Портал в историю Техаса, https: // texashistory.unt.edu; .

Копировать цитату

Распечатать / Поделиться этой страницей

Печать
Электронная почта
Твиттер
Facebook
Tumblr
Reddit

Книга Судей

% PDF-1.7 % 1 0 объект > / Metadata 2 0 R / Outlines 5 0 R / Pages 3 0 R / StructTreeRoot 6 0 R / Type / Catalog / Viewer Настройки >>> эндобдж 2 0 obj > поток application / pdf